本文選題：煙草　切入點：orf基因　出處：《核農(nóng)學報》2016年08期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為研究orf25基因的功能及其與煙草雄性不育性的相關(guān)性,通過PCR方法從質(zhì)粒p UC57-Pchs A中擴增了花特異性啟動子Pchs A,并以其取代植物表達載體p BI121中的組成型啟動子Ca MV35S,然后將orf25基因插入到Pchs A啟動子下游,構(gòu)建由Pchs A啟動子驅(qū)動的orf25基因表達載體,測序結(jié)果顯示植物表達載體p BI121-Pchs A-orf25構(gòu)建成功。將該表達載體導入根癌農(nóng)桿菌LBA4404中,采用根癌農(nóng)桿菌介導法遺傳轉(zhuǎn)化雄性不育煙草MS革新3號,共獲得76株轉(zhuǎn)基因煙草植株,經(jīng)PCR鑒定,轉(zhuǎn)基因陽性植株為18株,轉(zhuǎn)化率為23.7%。研究結(jié)果證明目的基因orf25已整合到煙草基因組中,為進一步探究該基因的功能及其與煙草雄性不育性的關(guān)系奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:To study the function of orf25 gene and its correlation with male sterility in tobacco, The floral specific promoter Pchs A was amplified from the plasmid p UC57-Pchs A by PCR method, and replaced the constitutive promoter Ca MV35Sin the plant expression vector p BI121. Then the orf25 gene was inserted into the downstream of the Pchs A promoter. Orf25 gene expression vector driven by Pchs A promoter was constructed. Sequencing results showed that the plant expression vector p BI121-Pchs A-orf25 was successfully constructed. The expression vector was introduced into Agrobacterium tumefaciens LBA4404. A total of 76 transgenic tobacco plants were obtained by Agrobacterium tumefaciens mediated genetic transformation of male sterile tobacco MS Jianyuan 3, and 18 transgenic positive plants were identified by PCR. The results showed that the target gene orf25 had been integrated into the tobacco genome, which laid a foundation for further exploring the function of the gene and its relationship with tobacco male sterility.
【作者單位】： 江西農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學院/作物生理生態(tài)與遺傳育種教育部重點實驗室/江西省作物生理生態(tài)與遺傳育種重點實驗室;贛州市煙草科學研究所;湖南農(nóng)業(yè)大學生物安全科學技術(shù)學院/植物病蟲害生物學與防控湖南省重點實驗室;江西農(nóng)業(yè)大學園林與藝術(shù)學院;
【基金】：國家自然科學基金項目(31260350,31301388) 江西省教育廳科技計劃項目(GJJ13275)
【分類號】：S572;Q943.2

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本文編號：1649704