地黃酪氨酸脫羧酶基因的克隆與表達分析
本文選題:地黃 切入點:酪氨酸脫氫酶 出處:《中國中藥雜志》2016年16期 論文類型:期刊論文
【摘要】:酪氨酸脫羧酶TyDC是植物次生代謝的催化酶,在苯乙醇苷類成分的生物合成中發(fā)揮重要作用。根據(jù)地黃轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),克隆了地黃酪氨酸脫羧酶基因RgTyDC的全長cDNA序列(GenBank登錄號KU640395),并進行生物信息學(xué)分析,采用實時熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測其在地黃不同組織及4種誘導(dǎo)子處理后毛狀根中的表達量。結(jié)果表明,RgTyDC ORF為1 619 bp,編碼509個氨基酸,相對分子質(zhì)量為56.6 kDa,等電點pI 6.25。RgTyDC與芝麻酪氨酸脫羧酶SiTyDC和猴面花酪氨酸脫羧酶EgTyDC的同源性最高,均為88%。RgTyDC基因在葉片(尤其是衰老的葉片)中表達量較強,在塊根中表達量較低。SA和MeJA處理后顯著上調(diào)表達。這為進一步研究RgTyDC在地黃苯乙醇苷類成分生物合成中的分子功能奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:Tyrosine decarboxylase (TyDC) is a catalytic enzyme for plant secondary metabolism and plays an important role in the biosynthesis of phenylethanosides. The full-length cDNA sequence of tyrosine decarboxylase gene RgTyDC of Rehmannia glutinosa was cloned. The expression of RGTyDC in hairy roots of Rehmannia glutinosa treated with different tissues and four inducers was detected by real-time fluorescence quantitative PCRQ RT-PCR.The results showed that the RG TyDC ORF was 1 619 BP, encoding 509 amino acids. The relative molecular weight was 56.6 kDa. the isoelectric point Pi 6.25.RgTyDC had the highest homology with sesame tyrosine decarboxylase SiTyDC and monkey flower tyrosine decarboxylase EgTyDC. After treatment with MeJA and SA, the expression of RgTyDC was upregulated significantly, which laid a foundation for further study on the molecular function of RgTyDC in the biosynthesis of phenylethanol glycosides from Rehmannia glutinosa.
【作者單位】: 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院;河南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院;福建農(nóng)林大學(xué)中藥材GAP研究所;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(81473299)
【分類號】:S567.234
【參考文獻】
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【共引文獻】
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【二級參考文獻】
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,本文編號:1637829
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