本文選題：乳酸菌　切入點(diǎn)：信號分子AI-　出處：《微生物學(xué)通報(bào)》2017年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：【目的】從錫盟地區(qū)酸馬奶酒分離的乳酸菌中篩選出高產(chǎn)信號分子自體誘導(dǎo)物2(Autoinducer-2,AI-2)的乳酸菌,通過優(yōu)化其重組蛋白Pfs的誘導(dǎo)條件體外合成信號分子AI-2�！痉椒ā坷蒙飳W(xué)發(fā)光法對不同乳酸菌產(chǎn)信號分子AI-2的產(chǎn)量進(jìn)行比較,以高產(chǎn)信號分子AI-2乳酸菌基因組DNA為模板,擴(kuò)增其S-腺苷高半胱氨酸核苷酶(S-adenosylhomocysteine nucleosidase,Pfs)基因,構(gòu)建原核表達(dá)載體。利用異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)進(jìn)行重組蛋白的誘導(dǎo)表達(dá),通過優(yōu)化培養(yǎng)基、誘導(dǎo)溫度、誘導(dǎo)前菌體密度、IPTG濃度以及誘導(dǎo)時(shí)間得到高表達(dá)的Pfs蛋白,使其與底物作用最終體外合成信號分子AI-2�！窘Y(jié)果】10株乳酸菌均可產(chǎn)信號分子AI-2,其中屎腸球菌8-3分泌信號分子AI-2的產(chǎn)量明顯高于其他菌株;重組蛋白的最佳誘導(dǎo)條件為:選取SOC(Super optimal broth with catabolite repression)作為誘導(dǎo)表達(dá)培養(yǎng)基,菌液OD600為0.5 0.7時(shí)加入終濃度為0.1 mmol/L的IPTG,37°C誘導(dǎo)12 h;利用最優(yōu)誘導(dǎo)條件獲得了濃度為4.08 g/L的純化Pfs蛋白,體外合成了信號分子AI-2�！窘Y(jié)論】酸馬奶酒中分離出的10株乳酸菌均可產(chǎn)生信號分子AI-2,且屎腸球菌8-3可通過Pfs基因的作用生成信號分子AI-2。
[Abstract]:[objective] to screen the high-yield signal molecule autoinducer 2AI-2 from the lactic acid bacteria isolated from the sour horse milk wine in Ximeng area. The signal molecule AI-2was synthesized by optimizing the induction conditions of its recombinant protein Pfs. [methods] the production of signal molecule AI-2 from different lactic acid bacteria was compared by using biological luminescence method. The genomic DNA of high yield signal molecule AI-2 was used as template. The Sadenosylhomocysteine nucleosidase gene was amplified and the prokaryotic expression vector was constructed. The recombinant protein was induced and expressed by isopropyl- 尾 -Dthiopyranoside galactoside (IPTG). The high expression of Pfs protein was obtained by the concentration of IPTG and the induction time before induction. The results showed that 10 strains of lactic acid bacteria could produce signal molecule AI-2, in which Enterococcus faecium 8-3 secreted signal molecule AI-2 was significantly higher than other strains. The optimal induction conditions of recombinant protein were as follows: SOC(Super optimal broth with catabolite expression was used as induction medium, and the final concentration of 0.1 mmol/L was added at 37 擄C for 12 h, and the purified Pfs protein was obtained with the concentration of 4.08 g / L, when OD600 was 0.5-0. 7, and the final concentration was 0.1 mmol/L at 37 擄C for 12 h. The signal molecule AI-2 was synthesized in vitro. [conclusion] all 10 strains of lactic acid bacteria isolated from yoghurt wine can produce signal molecule AI-2, and Enterococcus faecium 8-3 can produce signal molecule AI-2 through the action of Pfs gene.
【作者單位】： 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.31360396) 內(nèi)蒙古自治區(qū)研究生科研創(chuàng)新項(xiàng)目(No.B20151012908Z)~~
【分類號】：Q78;Q933

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 李博;顧悅;燕彩玲;賈原博;賀銀鳳;;高產(chǎn)信號分子AI-2乳酸菌的篩選及鑒定[J];食品工業(yè)科技;2016年02期

2 郭倩茹;賀銀鳳;;具有共生關(guān)系的乳酸菌和酵母菌的篩選[J];食品工業(yè)科技;2015年02期

3 張騰;田建軍;李梓媛;賈原博;賀銀鳳;;植物乳桿菌HE-1由AI-2/LuxS介導(dǎo)的群體感應(yīng)與生物膜形成關(guān)系的研究[J];食品工業(yè)科技;2014年05期

4 韓先干;白灝;劉蕾;陳文靜;丁鏟;胡青海;祁克宗;于圣青;;禽致病性大腸桿菌安徽分離株luxS和pfs基因的克隆、表達(dá)與細(xì)胞外合成AI-2活性檢測[J];微生物學(xué)報(bào);2012年09期

5 彭麗桃;李瓊;劉合生;陳佩;豐明乾;潘思軼;;重組植物硫化激動素PSK-α融合蛋白誘導(dǎo)表達(dá)條件的優(yōu)化[J];華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2007年06期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 楊杰;AI-2的體外合成及其對植物乳桿菌細(xì)菌素合成的影響[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

2 邵長林;糞腸球菌V583株LuxS/AI-2型群體感應(yīng)系統(tǒng)的研究[D];江南大學(xué);2012年

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉喬;姚國強(qiáng);李晶;胡殿庚;張和平;;乳酸菌與酵母菌混合發(fā)酵及凍干菌粉的研究[J];食品工業(yè);2016年12期

2 楊立軍;韓先干;尹會方;羅燕秋;左佳坤;徐達(dá);呂小龍;吳小卡;周鍵;王少輝;李金貴;于圣青;;福建省龍巖市禽致病性大腸桿菌的血清型、毒力因子及耐藥研究[J];中國動物傳染病學(xué)報(bào);2016年06期

3 劉蕾;桂萌;武瑞峗;李平蘭;;LuxS/AI-2型群體感應(yīng)系統(tǒng)調(diào)控細(xì)菌生物被膜形成研究進(jìn)展[J];食品科學(xué);2016年19期

4 顧悅;廉雪花;吳榮;田建軍;楊軍;賀銀鳳;;高產(chǎn)信號分子AI-2乳酸菌的篩選及其Pfs基因的克隆和表達(dá)[J];微生物學(xué)通報(bào);2017年05期

5 任曉鏷;李明楊;陳勝慧子;牛希躍;許倩;;乳酸菌分離及混菌培養(yǎng)對釀酒酵母乙醇發(fā)酵的影響[J];農(nóng)業(yè)機(jī)械學(xué)報(bào);2016年08期

6 胡殿庚;姚國強(qiáng);郭建林;劉喬;張雪梅;韓琬;趙旭;張和平;;Lactobacillus casei Zhang與Saccharomy cescerevisiae QH2-2混合培養(yǎng)工藝的研究[J];中國乳品工業(yè);2016年06期

7 燕彩玲;李博;顧悅;賈原博;劉亞東;賀銀鳳;;信號分子AI-2的檢測方法研究進(jìn)展[J];微生物學(xué)通報(bào);2016年06期

8 王敏;李寧求;閆茂倉;常維山;郝金婷;龐曉茹;王雪鵬;;遲緩愛德華菌luxS基因在不同生長時(shí)期表達(dá)水平的差異[J];微生物學(xué)報(bào);2015年09期

9 楊杰;張?bào)?孟祥晨;;重組蛋白LuxS誘導(dǎo)表達(dá)及純化條件的優(yōu)化[J];食品科學(xué);2015年19期

10 王玉霞;高麗;江文欣;馬瑞;唐子圣;朱彩蓮;何智妍;黃正蔚;;變異鏈球菌LuxS缺陷株甲基循環(huán)通路的恢復(fù)構(gòu)建[J];上�？谇会t(yī)學(xué);2014年04期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 李博;不同生理環(huán)境脅迫對乳酸菌產(chǎn)信號分子AI-2影響的研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

2 塔娜;對產(chǎn)細(xì)菌素的糞腸球菌群體感應(yīng)現(xiàn)象的研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

3 尚偉;長雙歧桿菌XY01生理特性和比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];江南大學(xué);2013年

【二級參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前9條

1 張騰;賀銀鳳;;堅(jiān)強(qiáng)腸球菌SQ-3-2基于Lux S群體感應(yīng)系統(tǒng)信號分子AI-2的檢測及方法優(yōu)化[J];食品與發(fā)酵工業(yè);2013年02期

2 劉敏敏;賀銀鳳;;酸馬奶中具有潛在共生性乳酸菌和酵母菌的篩選[J];食品科學(xué);2011年11期

3 邵長林;孫忠科;廖祥儒;袁靜;;群體感應(yīng)與病原菌致病性研究進(jìn)展[J];生物技術(shù)通訊;2011年03期

4 陳文靜;韓先干;何亮;胡青海;于圣青;;鴨致病性大腸桿菌的分離鑒定及其生物學(xué)特性分析[J];中國動物傳染病學(xué)報(bào);2010年02期

5 王洪志;;奶啤生產(chǎn)中乳酸菌對酵母菌發(fā)酵作用的研究[J];中國釀造;2009年06期

6 許艷,萬敏,程巖,張培因,吳秀麗,王燕媚,王麗穎;重組人白細(xì)胞介素-4融合蛋白在大腸桿菌中誘導(dǎo)表達(dá)的影響因素[J];中國生物制品學(xué)雜志;2004年06期

7 章文賢,李敏,涂桂云,吳雪偉,周志華;重組拖絲蛋白基因在大腸桿菌中表達(dá)條件的優(yōu)化[J];福建師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2003年02期

8 葉姣,陳長華,夏杰,付水林,楊雅琴;溫度對重組大腸桿菌生長及外源蛋白表達(dá)的影響[J];華東理工大學(xué)學(xué)報(bào);2002年04期

9 趙寶華,許崇波;不同培養(yǎng)條件對抗α毒素ScFv基因表達(dá)的影響[J];微生物學(xué)通報(bào);2002年02期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前9條

1 劉秀華,唐朝樞;細(xì)胞質(zhì)內(nèi)信號分子的核轉(zhuǎn)位及其機(jī)制[J];生理科學(xué)進(jìn)展;1999年02期

2 單佑安,劉小華,羅向東,楊宗城;內(nèi)毒素直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞激活信號分子的研究[J];西北國防醫(yī)學(xué)雜志;2001年01期

3 劉俏;王劍鋒;趙明明;范圣第;;囊泡表面氨基酸信號分子與維生素B_6衍生物受體反應(yīng)平衡常數(shù)的估計(jì)[J];計(jì)算機(jī)與應(yīng)用化學(xué);2012年03期

4 張文利,沈文飚,徐朗萊;一氧化氮在植物體內(nèi)的信號分子作用[J];生命的化學(xué);2002年01期

5 白曉春,白潔,羅深秋;磷脂酰肌醇二磷酸[J];生命的化學(xué);2001年02期

6 趙芊;賈振華;宋水山;;細(xì)菌信號分子N-�；呓z氨酸內(nèi)酯調(diào)控植物抗性的研究進(jìn)展[J];植物生理學(xué)報(bào);2014年02期

7 歐陽明;王瑋;李愛英;楊青;;從皮層細(xì)胞骨架到信號分子:ERM蛋白質(zhì)的調(diào)控魔力[J];生命的化學(xué);2010年02期

8 劉錦華;唐旭東;;Slug的分子調(diào)控機(jī)制[J];生命的化學(xué);2013年05期

9 ;[J];;年期

相關(guān)會議論文 前2條

1 陳士云;王瑤;楊寶玉;宋冬林;;閾值敏感信號分子研究進(jìn)展[A];廿一世紀(jì)微生物學(xué)發(fā)展前沿與應(yīng)用新技術(shù)研討會論文摘要集[C];2003年

2 張光波;董秋明;朱一蓓;張學(xué)光;;協(xié)同共信號分子人4-1BB在肺癌上的表達(dá)及其生物學(xué)意義[A];第九屆全國腫瘤生物治療學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前2條

1 第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所 曾春雨　整理 周元禮 鄒爭春;癌癥關(guān)鍵信號分子研究新成果[N];健康報(bào);2010年

2 張?zhí)锟?植物智慧啟迪人類重新思考[N];大眾科技報(bào);2003年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 刀國華;土壤粘粒礦物與信號分子CSF的互作及其對Bacillus subtilis自然轉(zhuǎn)化的影響[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

2 張笑笑;大黃魚腐敗希瓦氏菌群體感應(yīng)信號分子AHLs對其致腐性的影響及機(jī)制研究[D];浙江工商大學(xué);2017年

，

本文編號：1632919