發(fā)布時間：2018-03-18 16:42

  本文選題：急性白血病　切入點：HL-　出處：《實用醫(yī)學雜志》2017年03期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:觀察慢病毒載體介導shRNA靶向沉默組蛋白賴氨酸特異性去甲基化酶1(LSD1)基因對人急性髓系白血病細胞凋亡與細胞周期的影響。方法:利用慢病毒載體構建人急性早幼粒細胞白血病HL-60細胞和急性單核細胞白血病SHI-1細胞LSD1基因干擾的穩(wěn)定細胞系。設置空白對照組、空載體對照組和LSD1-shRNA干擾組,采用實時熒光定量PCR和Western blot方法分別檢測LSD1的mRNA和蛋白表達水平;Annexin V-PE/7-AAD染色后利用流式細胞術檢測細胞凋亡;PI染色后檢測細胞周期。結果:HL-60細胞和SHI-1細胞LSD1-shRNA干擾組LSD1 mRNA和蛋白表達水平相較于空白對照組及空載體對照組均顯著下調(P0.01)。干擾LSD1后,HL-60細胞和SHI-1細胞凋亡率明顯增加(P0.01),細胞周期阻滯于G_0/G_1期(P0.01)。結論:shRNA下調LSD1表達使人急性髓系白血病細胞凋亡增加并發(fā)生細胞周期G_0/G_1期阻滯。
[Abstract]:Objective: to observe the effect of lentivirus vector mediated shRNA targeting histidine specific demethylase 1 (LSD1) gene on apoptosis and cell cycle of human acute myeloid leukemia cells. Methods: human acute myeloid leukemia cells were constructed with lentivirus vector. Stable cell lines interfering with LSD1 gene in HL-60 cells of promyelocytic leukemia and SHI-1 cells of acute monocytic leukemia. Empty carrier control group and LSD1-shRNA interference group, Real-time fluorescence quantitative PCR and Western blot were used to detect mRNA and protein expression level of LSD1. Annexin V-PE-7-AAD staining was used to detect cell cycle. The expression level of LSD1 mRNA and protein was significantly lower than that of blank control group and empty vector control group. The apoptosis rate of HL-60 cells and SHI-1 cells increased significantly after interfering with LSD1, and the cell cycle was blocked in GStud / G1 phase P0.01.Conclusion the down-regulation of LSD1 expression by LSD1 shRNA is urgent. Apoptosis of myeloid leukemia cells increased and cell cycle G _ 0 / G _ (1) arrest occurred.
【作者單位】： 廣州醫(yī)科大學附屬廣州市第一人民醫(yī)院血液內科;
【基金】：廣東省醫(yī)學科研基金項目(編號:A2012492) 廣東省自然科學基金項目(編號:2014A030313676) 廣州市醫(yī)藥衛(wèi)生科技項目重點項目(編號:20121A021005);廣州市醫(yī)藥衛(wèi)生科技項目一般引導項目(編號:20141A0100010) 廣東省科技計劃項目(編號:2011B031800290)
【分類號】：R733.71

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