shRNA下調(diào)LSD1基因表達(dá)對(duì)人急性髓系白血病細(xì)胞凋亡與細(xì)胞周期的影響
本文選題:急性白血病 切入點(diǎn):HL- 出處:《實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志》2017年03期 論文類(lèi)型:期刊論文
【摘要】:目的:觀察慢病毒載體介導(dǎo)shRNA靶向沉默組蛋白賴(lài)氨酸特異性去甲基化酶1(LSD1)基因?qū)θ思毙运柘蛋籽〖?xì)胞凋亡與細(xì)胞周期的影響。方法:利用慢病毒載體構(gòu)建人急性早幼粒細(xì)胞白血病HL-60細(xì)胞和急性單核細(xì)胞白血病SHI-1細(xì)胞LSD1基因干擾的穩(wěn)定細(xì)胞系。設(shè)置空白對(duì)照組、空載體對(duì)照組和LSD1-shRNA干擾組,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot方法分別檢測(cè)LSD1的mRNA和蛋白表達(dá)水平;Annexin V-PE/7-AAD染色后利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡;PI染色后檢測(cè)細(xì)胞周期。結(jié)果:HL-60細(xì)胞和SHI-1細(xì)胞LSD1-shRNA干擾組LSD1 mRNA和蛋白表達(dá)水平相較于空白對(duì)照組及空載體對(duì)照組均顯著下調(diào)(P0.01)。干擾LSD1后,HL-60細(xì)胞和SHI-1細(xì)胞凋亡率明顯增加(P0.01),細(xì)胞周期阻滯于G_0/G_1期(P0.01)。結(jié)論:shRNA下調(diào)LSD1表達(dá)使人急性髓系白血病細(xì)胞凋亡增加并發(fā)生細(xì)胞周期G_0/G_1期阻滯。
[Abstract]:Objective: to observe the effect of lentivirus vector mediated shRNA targeting histidine specific demethylase 1 (LSD1) gene on apoptosis and cell cycle of human acute myeloid leukemia cells. Methods: human acute myeloid leukemia cells were constructed with lentivirus vector. Stable cell lines interfering with LSD1 gene in HL-60 cells of promyelocytic leukemia and SHI-1 cells of acute monocytic leukemia. Empty carrier control group and LSD1-shRNA interference group, Real-time fluorescence quantitative PCR and Western blot were used to detect mRNA and protein expression level of LSD1. Annexin V-PE-7-AAD staining was used to detect cell cycle. The expression level of LSD1 mRNA and protein was significantly lower than that of blank control group and empty vector control group. The apoptosis rate of HL-60 cells and SHI-1 cells increased significantly after interfering with LSD1, and the cell cycle was blocked in GStud / G1 phase P0.01.Conclusion the down-regulation of LSD1 expression by LSD1 shRNA is urgent. Apoptosis of myeloid leukemia cells increased and cell cycle G _ 0 / G _ (1) arrest occurred.
【作者單位】: 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬?gòu)V州市第一人民醫(yī)院血液內(nèi)科;
【基金】:廣東省醫(yī)學(xué)科研基金項(xiàng)目(編號(hào):A2012492) 廣東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào):2014A030313676) 廣州市醫(yī)藥衛(wèi)生科技項(xiàng)目重點(diǎn)項(xiàng)目(編號(hào):20121A021005);廣州市醫(yī)藥衛(wèi)生科技項(xiàng)目一般引導(dǎo)項(xiàng)目(編號(hào):20141A0100010) 廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào):2011B031800290)
【分類(lèi)號(hào)】:R733.71
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