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反義4CL基因調(diào)節(jié)煙草木質(zhì)素生物合成

發(fā)布時(shí)間:2018-03-18 09:18

  本文選題:木質(zhì)素 切入點(diǎn):煙草 出處:《分子植物育種》2017年11期  論文類型:期刊論文


【摘要】:采用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)法的葉盤轉(zhuǎn)化法,將紫穗槐反義4CL基因片段導(dǎo)入煙草中,獲得T0代陽性轉(zhuǎn)化植株。T0代轉(zhuǎn)基因植株自花授粉,收獲種子,種植后獲得T1代植株。PCR、RT-PCR(T1代)檢測、目的片段測序的結(jié)果表明,反義4CL基因已經(jīng)穩(wěn)定遺傳到T1代中。T1代煙草陽性植株和陰性植株的比例為77:23,接近于3:1。兩株T1代煙草轉(zhuǎn)化植株q RT-PCR及4CL酶含量檢測表明,葉片4CL1基因表達(dá)量較野生植株降低了19.51%;莖4CL酶含量降低了10.50%,說明該反義基因能夠干擾煙草4CL基因的表達(dá)。T1代煙草莖木質(zhì)素含量平均下降了11.87%,根木質(zhì)素含量降低了14.23%。種植60 d的轉(zhuǎn)基因植株與野生型植株生長一致,在株高、株重等方面差異不顯著(p0.05),說明反義4CL基因的轉(zhuǎn)入在降低了木質(zhì)素含量的同時(shí)并沒有影響煙草的正常生長。
[Abstract]:Using Agrobacterium tumefaciens-mediated leaf disk transformation, the antisense 4CL gene fragment of Amorpha fruticosa was introduced into tobacco. The transgenic plants of generation T0 and generation T0 were self-pollinated and harvested seeds. After planting, T1 generation plants were obtained. Objective the results of fragment sequencing showed that the proportion of antisense 4CL gene to the positive and negative tobacco plants in T1 generation was 77: 23, which was close to 3: 1.The results of Q RT-PCR and 4CL enzyme contents of two T1 generation tobacco transformation plants showed that the antisense 4CL gene was stable in T1 generation. Leaf 4CL1 gene expression decreased 19.51% compared with wild plants, stem 4CL enzyme content decreased 10.50%, indicating that the antisense gene could interfere with tobacco 4CL gene expression. T1 generation tobacco stem lignin content decreased by 11.87%, root lignin content decreased. 14.23. the transgenic plants planted for 60 days grew the same as the wild-type plants. There was no significant difference in plant height and plant weight, indicating that the transfer of antisense 4CL gene decreased lignin content and did not affect the normal growth of tobacco.
【作者單位】: 遼寧大學(xué)生命科學(xué)院;
【基金】:遼寧省自然科學(xué)基金(2012020283)資助
【分類號(hào)】:S572

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本文編號(hào):1628967

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