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斜帶石斑魚(yú)卷軸受體3基因的分離及表達(dá)分析研究

發(fā)布時(shí)間:2018-03-16 01:26

  本文選題:斜帶石斑魚(yú) 切入點(diǎn):卷軸受體基因 出處:《中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》2017年01期  論文類(lèi)型:期刊論文


【摘要】:利用cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)(Rapid amplification of cDNA ends,RACE)克隆鑒定出斜帶石斑魚(yú)(Epinephelus coioides)卷軸受體3(Frizzled 3,gFZD3)基因的cDNA序列全長(zhǎng),使用ClustalX(1.81)和MEGA4.0軟件分別進(jìn)行了序列同源比對(duì)和系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析;利用RT-PCR檢測(cè)gFZD3在成魚(yú)不同組織中的表達(dá)和gFZD3在胚胎發(fā)育及卵巢發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)模式。研究顯示:gFZD3cDNA序列全長(zhǎng)為2 278bp,其中開(kāi)放讀碼框?yàn)? 079bp,編碼692個(gè)氨基酸;序列同源性分析表明,gFZD3的氨基酸序列具有FZD家族保守的功能結(jié)構(gòu)域;脊椎動(dòng)物的FZD3系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析顯示,斜帶石斑魚(yú)與大黃魚(yú)(Larimichthys crocea)的親緣關(guān)系最近;在成魚(yú)的組織分布中,只在腦區(qū)和性腺中檢測(cè)到gFZD3表達(dá)信號(hào),其中在卵巢中表達(dá)量最高;在胚胎發(fā)育過(guò)程中,在未受精卵和受精卵中g(shù)FZD3的表達(dá)量最高,隨著胚胎的發(fā)育呈逐漸下降趨勢(shì);在卵巢發(fā)育過(guò)程中,gFZD3的表達(dá)在早期卵巢中相對(duì)較低,在隨后的III和IV期卵巢中較高。研究結(jié)果表明,FZD3序列在脊椎動(dòng)物中具有較高的保守性;斜帶石斑魚(yú)gFZD3的表達(dá)具有明顯的組織特異性,并在胚胎和卵巢發(fā)育中,可能主要作用于胚胎發(fā)育的早期和卵巢發(fā)育的后期。本研究為進(jìn)一步研究Wnt信號(hào)通路在斜帶石斑魚(yú)生殖調(diào)控中的作用提供了參考。
[Abstract]:Rapid amplification of cDNA endsrase (RACEE) was used to clone and identify the full length of the cDNA gene of Epinephelus coioides-3 (Frizzled 3gFZD3) gene. The sequence homology alignment and phylogenetic tree analysis were performed by ClustalXS1.81) and MEGA4.0 software, respectively. RT-PCR was used to detect the expression of gFZD3 in different tissues of adult fish and the expression pattern of gFZD3 in embryonic development and ovarian development. The results showed that the full length of the cDNA sequence was 2278bp. the open reading frame was 2079bp, encoding 692 amino acids. Sequence homology analysis showed that the amino acid sequence of GFZD3 had the conserved functional domain of FZD family, and the FZD3 phylogenetic tree analysis of vertebrates showed that there was the closest phylogenetic relationship between the oblique grouper and Larimichthys Crocea, and in the tissue distribution of adult fish, The expression of gFZD3 was detected only in the brain and gonad, the highest in ovary, the highest in unfertilized egg and fertilized egg during embryonic development, and decreased gradually with the development of embryo. The expression of gFZD3 was relatively low in the early stage of ovarian development and higher in the subsequent stages of III and IV. The results showed that the FZD3 sequence was highly conserved in vertebrates. The expression of gFZD3 in Epinephelus obliquus has obvious tissue specificity and is found in embryonic and ovarian development. This study may play an important role in the early stage of embryonic development and the late stage of ovarian development. This study provides a reference for further study on the role of Wnt signaling pathway in the reproductive regulation of Epinephelus oblique.
【作者單位】: 廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院海洋生態(tài)與養(yǎng)殖環(huán)境湛江市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;三亞市海洋與漁業(yè)監(jiān)測(cè)中心;
【基金】:廣東省海洋漁業(yè)科技推廣專(zhuān)項(xiàng)(A201408A06) 海南省科技合作專(zhuān)項(xiàng)(KJHZ2015-08)資助~~
【分類(lèi)號(hào)】:S917.4

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本文編號(hào):1617732

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