本文選題：牛　切入點(diǎn)：結(jié)蛋白　出處：《畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2016年12期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：本研究在前期研究工作的基礎(chǔ)上,通過(guò)添加特異的調(diào)控元件對(duì)牛結(jié)蛋白(Desimn)基因啟動(dòng)子進(jìn)行改造,以期獲得活性較高且具有肌肉組織特異性的啟動(dòng)子。本研究以300bp的牛結(jié)蛋白基因啟動(dòng)子為基礎(chǔ),對(duì)其進(jìn)行改造,即通過(guò)串聯(lián)多拷貝的正調(diào)控元件的方式,成功構(gòu)建了3個(gè)改造后的結(jié)蛋白基因啟動(dòng)子片段:pGL3-desmin300-desmin180、pGL3-MD-αD1-desmin300和pGL3-αD2-αD1-desmin300。結(jié)果表明,pGL3-desmin300-desmin180、pGL3-MD-αD1-desmin300和pGL3-αD2-αD1-desmin300的啟動(dòng)子活性分別是野生型啟動(dòng)子pGL3-desmin300的1.67、2.56和2.88倍,說(shuō)明改造后的啟動(dòng)子片段具有較高的啟動(dòng)活性。同時(shí),牛骨胳肌衛(wèi)星細(xì)胞和成纖維細(xì)胞試驗(yàn)結(jié)果表明,以上3組改造后的啟動(dòng)子片段具有較強(qiáng)的肌肉特異性,以上高效肌肉特異性啟動(dòng)子片段的應(yīng)用為提高肌肉產(chǎn)量的轉(zhuǎn)基因家畜肉的生產(chǎn)提供重要幫助。
[Abstract]:On the basis of previous research work, the promoter of bovine desmin gene was modified by adding specific regulatory elements. The aim of this study was to obtain a highly active and muscle-specific promoter. Based on the 300bp bovine desmin gene promoter, the promoter was modified by a series of multiple copies of positive regulatory elements. Three modified promoter fragments of desmin gene: pGL3-desmin300-desmin180, pGL3-MD- 偽 D1-desmin300 and pGL3- 偽 D2- 偽 D1-desmin300 were successfully constructed. The results showed that the promoter activity of pGL3-desmin300 and pGL3- 偽 D2- 偽 D1-desmin300 was 1.67 / 2.56 and 2.88 times of that of wild type promoter pGL3-desmin300, respectively. The experimental results of bovine skeletal muscle satellite cells and fibroblasts showed that the above three groups of modified promoter fragments had strong muscle specificity. The application of these highly efficient muscle specific promoter fragments provides important help for the production of transgenic domestic meat with increased muscle yield.
【作者單位】： 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：基金項(xiàng)目:高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)轉(zhuǎn)基因肉牛新品種培育(2014ZX08007-002)
【分類號(hào)】：S823

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本文編號(hào)：1617023