本文選題：花生　切入點：膜聯(lián)蛋白基因　出處：《華北農(nóng)學報》2017年03期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為挖掘花生抗逆境脅迫相關(guān)基因,克隆抗逆相關(guān)膜聯(lián)蛋白Annexin基因,以花生品種花育25號為試驗材料,從已知抑制消減雜交文庫中獲得花生膜聯(lián)蛋白Annexin類似基因片段,通過RACE技術(shù)獲得Annexin基因5'-RACE片段。對5'-RACE序列和抑制消減雜交文庫中已知基因片段進行拼接,設(shè)計特異引物通過逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應(RT-PCR)擴增得到該基因,命名為AhAnn1。結(jié)果表明,AhAnn1全長為1 277 bp,開放閱讀框為951 bp。根據(jù)編碼區(qū)預測AhAnn1編碼一條316個氨基酸組成的多肽,預測分子量為36.10 k Da,等電點為7.07。預測該基因編碼的蛋白含有膜聯(lián)蛋白Annexin保守結(jié)構(gòu)域,定位于細胞質(zhì)中。蛋白序列多重比對和系統(tǒng)發(fā)育分析表明,花生與大豆、苜蓿、鷹嘴豆等豆科植物中的膜聯(lián)蛋白相似性最高,親緣關(guān)系最近。熒光實時定量PCR結(jié)果顯示,AhAnn1在根系和葉片中的表達量隨干旱脅迫程度的增加而增加。由此推測AhAnn1是一種干旱脅迫應答基因,在花生逆境調(diào)控中發(fā)揮作用。結(jié)果為進一步研究花生AhAnn1基因的功能和花生抗逆境脅迫相關(guān)分子機理提供了理論基礎(chǔ)。
[Abstract]:For mining peanut stress resistance related genes, cloning resistance related annexin Annexin gene, peanut cultivar Huayu 25 as test material, known from the suppression subtractive hybridization library in peanut annexin Annexin like gene fragment by RACE from Annexin gene 5'-RACE fragment. The 5'-RACE sequence and known suppression subtractive hybrid library gene fragments were spliced with specific primers by reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) amplified the gene, named AhAnn1.. The results showed that the full-length AhAnn1 was 1277 BP, the open reading frame of 951 bp. encoding a AhAnn1 polypeptide according to 316 amino acids predicted encoding region, a predicted molecular weight of 36.10 K Da, the isoelectric point of 7.07. to predict the gene encoding a protein containing annexin Annexin conserved domain, located in the cytoplasm. The protein multiple sequence alignment and system Fertility analysis showed that peanut and soybean, alfalfa, chickpeas and other legumes annexin the highest similarity, the closest genetic relationship. Real time fluorescent quantitative PCR results showed that the expression of AhAnn1 in roots and leaf weight with the increase of drought stress increased. It suggested that AhAnn1 is a kind of drought stress responsive genes. Play a role in the regulation of stress in peanut. The results provide a theoretical basis for further research on the molecular mechanism of stress related peanut AhAnn1 gene function and peanut anti adversity.

【作者單位】： 山東省花生研究所;
【基金】：山東省農(nóng)業(yè)科學院青年英才培養(yǎng)計劃項目 山東省優(yōu)秀中青年科學家科研獎勵基金項目(BS2012NY010) 國家自然科學基金項目(31201171) 山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系花生創(chuàng)新團隊(SDAIT-04-06)
【分類號】：Q943.2;S565.2

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本文編號：1615301