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梅花鹿胸腺素β4基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定

發(fā)布時(shí)間:2018-03-12 06:37

  本文選題:梅花鹿 切入點(diǎn):胸腺素β 出處:《畜牧與獸醫(yī)》2017年08期  論文類型:期刊論文


【摘要】:為了構(gòu)建梅花鹿胸腺素β4(Tβ4)基因真核表達(dá)載體,使用TRIzol法提取梅花鹿鹿茸總RNA,RT-PCR方法特異性擴(kuò)增梅花鹿Tβ4基因,目的基因插入真核表達(dá)載體VR1012構(gòu)建表達(dá)質(zhì)粒,將質(zhì)粒瞬時(shí)轉(zhuǎn)染到293T人胚腎細(xì)胞系,使用Western blot和免疫熒光方法檢測(cè)目的基因的表達(dá)。結(jié)果顯示:克隆得到的梅花鹿Tβ4基因長(zhǎng)度為135 bp,編碼44個(gè)氨基酸,成功構(gòu)建真核表達(dá)載體VR1012-Tβ4-HA,轉(zhuǎn)染后梅花鹿Tβ4在293T細(xì)胞中表達(dá),而且主要表達(dá)在細(xì)胞漿中。本試驗(yàn)為進(jìn)一步研究Tβ4在鹿茸生長(zhǎng)中的作用奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to construct the eukaryotic expression vector of sika deer thymosin 尾 4N T 尾 4) gene, the T 尾 4 gene of sika deer was specifically amplified by TRIzol. The target gene was inserted into eukaryotic expression vector VR1012 to construct the expression plasmid. The plasmid was transiently transfected into 293T human embryonic kidney cell line. The expression of the target gene was detected by Western blot and immunofluorescence. The results showed that the length of T 尾 4 gene of sika deer was 135bp, encoding 44 amino acids. The eukaryotic expression vector VR1012-T 尾 4-HAwas successfully constructed. After transfection, T 尾 4 was expressed in 293T cells and mainly in the cytoplasm, which laid a foundation for further study on the role of T 尾 4 in the growth of velvet antler.
【作者單位】: 長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥與生物工程研究開發(fā)中心;
【基金】:吉林省科技發(fā)展計(jì)劃(20140622003JC)
【分類號(hào)】:S825

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本文編號(hào):1600370

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