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豬STC-1 siRNA設(shè)計及其基因沉默效率檢測

發(fā)布時間:2018-03-11 15:10

  本文選題: 切入點:斯鈣素 出處:《揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版)》2017年01期  論文類型:期刊論文


【摘要】:根據(jù)豬肌肉斯鈣素(STC)mRNA序列設(shè)計3對小干擾RNA(siRNA)、陰性對照siRNA,轉(zhuǎn)染PK15細(xì)胞后,通過熒光觀察轉(zhuǎn)染效率和基因表達(dá)效率,利用實時熒光定量PCR(QRT-PCR)及Western blot測定細(xì)胞內(nèi)siRNA基因沉默后STC-1siRNA及蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果表明:3個STC-1siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞后均有較高的熒光信號;STC-132細(xì)胞組STC-1mRNA和STC-1蛋白相對表達(dá)水平都最低,該組與其他組差異極顯著。結(jié)果說明成功設(shè)計出STC-1siRNA序列,為后續(xù)通過調(diào)控STC-1表達(dá)研究其在肌肉發(fā)育中的功能奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Three pairs of siRNAs with small interference RNAs and negative control siRNAs were designed according to the siRNA sequence of porcine musculocalskalcin (STC). After transfection of siRNAs into PK15 cells, the transfection efficiency and gene expression efficiency were observed by fluorescence. The expression levels of STC-1siRNA and protein after siRNA gene silencing were measured by real-time fluorescence quantitative PCR and Western blot. The results showed that the relative expression levels of STC-1mRNA and STC-1 were the lowest in all three STC-1siRNA transfected cells. The results showed that the STC-1siRNA sequence was successfully designed, which laid a foundation for the further study of its function in muscle development by regulating the expression of STC-1.
【作者單位】: 揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院/江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(31272405) 江蘇高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程項目(2014-09) 江蘇高校品牌專業(yè)建設(shè)工程項目(TAAP 2015-2018)
【分類號】:S828

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本文編號:1598707

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