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核盤菌液滴凝集素SSL-6基因過表達質(zhì)粒構(gòu)建與油菜轉(zhuǎn)化

發(fā)布時間:2018-03-11 12:33

  本文選題:核盤菌 切入點:分泌液滴 出處:《分子植物育種》2017年01期  論文類型:期刊論文


【摘要】:菌核病是由腐生型真菌核盤菌寄生引起的一種世界范圍性嚴重病害,是我國油菜的主要病害之一,嚴重影響油菜的品質(zhì)和產(chǎn)量。目前沒有找到針對核盤菌的有效的免疫資源,因此通過不同的途徑來開展抗菌核病抗性資源篩選研究具有非常重要的現(xiàn)實意義。本研究本著"以毒攻毒"的思路,將核盤菌自身可能參與致病的分泌型凝集素蛋白SSL-6基因轉(zhuǎn)入甘藍型油菜中,以期獲得具有抗菌核病的油菜種質(zhì)資源。通過基因克隆、過表達載體構(gòu)建和借助根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的油菜遺傳轉(zhuǎn)化,將SSL-6基因轉(zhuǎn)到甘藍型油菜"中雙6號"基因組中;經(jīng)過潮霉素抗性篩選與PCR鑒定,成功獲得了75株轉(zhuǎn)基因油菜;進一步RT-PCR檢測,篩選到5株SSL-6基因高表達的轉(zhuǎn)基因植株。這些轉(zhuǎn)基因油菜植株為下一步菌核病的抗性研究提供了重要的基礎(chǔ)材料。
[Abstract]:Sclerotinia sclerotiorum is a worldwide serious disease caused by sclerotia sclerotiorum. It is one of the major diseases of rapeseed in China, which seriously affects the quality and yield of rapeseed. At present, no effective immune resources have been found for Sclerotinia sclerotiorum. Therefore, it is of great practical significance to study the screening of resistant resources to Sclerotinia sclerotiorum through different ways. The secretory lectin protein SSL-6 gene of Sclerotinia sclerotiorum was transferred into Brassica napus in order to obtain the germplasm resources with resistance to Sclerotinia sclerotiorum (Sclerotinia sclerotiorum). Overexpression vector was constructed and transformed into "Zhongshuang 6" genome of Brassica napus by Agrobacterium tumefaciens-mediated genetic transformation, and 75 transgenic rapeseed were successfully obtained by hygromycin resistance screening and PCR identification. Five transgenic plants with high expression of SSL-6 gene were screened by further RT-PCR detection. These transgenic plants provide important basic materials for the further study on the resistance of sclerotia sclerotiorum to Sclerotinia sclerotiorum.
【作者單位】: 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院;湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;
【基金】:國家支撐計劃項目(2013BAD01B03-10)資助
【分類號】:S435.654;Q943.2

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本文編號:1598185

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