本文選題：一穴肛畸形　切入點：腹腔鏡　出處：《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院》2016年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：第一部分：腹腔鏡輔助治療高位一穴肛畸形及系統(tǒng)性療效評價研究背景一穴肛畸形是先天性肛門直腸畸形中最嚴重的一種特殊類型,表現(xiàn)為直腸、尿道及陰道發(fā)育不良,匯合成一共同管開口于會陰。一穴肛畸形的手術(shù)治療一直以來都是小兒普通外科、泌尿外科領(lǐng)域研究熱點,治療不僅要恢復(fù)肛門、尿道及陰道正常解剖結(jié)構(gòu),還要恢復(fù)其相應(yīng)功能,手術(shù)復(fù)雜、術(shù)后并發(fā)癥常見,預(yù)后不良。目前腹腔鏡輔助技術(shù)已廣泛運用于肛門閉鎖合并尿道瘺、膀胱瘺的治療,但腹腔鏡輔助治療一穴肛畸形仍無詳細的報道及系統(tǒng)性療效評價。研究目的本研究通過系統(tǒng)地評價腹腔鏡輔助肛門成形術(shù)及尿道、陰道成形術(shù)的術(shù)中情況及預(yù)后,探討腹腔鏡技術(shù)在一穴肛畸形治療中的可行性及有效性。研究方法本研究回顧了2005.11-2015.2期間手術(shù)治療的高位一穴肛畸形患兒26例,陰道缺如,需行腸管代陰道手術(shù)者,未納入本研究。腹腔鏡輔助肛門成形術(shù)及尿道成形-陰道成形術(shù)(LAARP組)17例,其中,2005.11-2014.6,12例患者采用傳統(tǒng)三切口腹腔鏡手術(shù)；2014.6-2015.2,5例患者采用經(jīng)臍單切口手術(shù)；經(jīng)腹會陰聯(lián)合肛門成形術(shù)及尿道成形-陰道成形手術(shù)組(APPT組)9例。通過對比LAARP組與APPT組患兒的手術(shù)年齡、骶骨比例(SR值)、共同管長度、手術(shù)持續(xù)時間、術(shù)中出血量、術(shù)后住院時間、術(shù)后并發(fā)癥、術(shù)后排便功能等指標系統(tǒng)地評價兩組的療效。結(jié)果26名高位一穴肛畸形患兒均手術(shù)成功,LAARP組無患兒中轉(zhuǎn)開腹,術(shù)后一直接受隨訪,失訪率為0%,隨訪時間1-11年,平均(4.7士2.8)年。兩組患兒手術(shù)年齡、共同管長度、合并脊柱骶骨畸形情況、骶骨比例(SR)無明顯差異。LAARP組手術(shù)時間(124.1±4.9)min短于APPT組(131.8±3.2) min(P0.01), LAARP組手術(shù)出血量(10.5士2.2)ml較APPT組(16.2士2.7)ml少(P0.01),術(shù)后住院時間LAARP組明顯短于APPT組(P0.01)。術(shù)后LAARP組有2例忠兒存在直腸粘膜脫垂,APPT組1例,無統(tǒng)計學(xué)差異,而APPT組有1例患兒存在切口感染,兩組均無尿道陰道痿復(fù)發(fā)、肛門狹窄、尿道狹窄等并發(fā)癥。排便功能對比以Krickenbeck標準評價,賦值后LAARP組總評分明顯優(yōu)于APPT組(p=0.047),但單獨比較兩組自主排便運動、便秘、污便三個方面評分值無明顯統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論腹腔鏡輔助手術(shù)可運用于一穴肛畸形的治療并可獲得較為滿意的療效,且具有微創(chuàng)、術(shù)野清晰等獨特優(yōu)勢。第二部分 基于全基因組外顯子測序技術(shù)的“一穴肛’’畸形致病基因篩選研究背景一穴肛畸形(Persistent Cloaca, PC),即先天性肛門直腸畸形合并泄殖腔畸形,是最嚴重的一種先天性肛門直腸畸形,有49.4%左右的患兒合并泌尿生殖、心血管、消化及中樞神經(jīng)等其他系統(tǒng)的發(fā)育異常,部分表現(xiàn)為嚴重多系統(tǒng)綜合癥。一穴肛畸形的發(fā)病機制及病因尚不明確,基因突變可能是導(dǎo)致其發(fā)病的重要致病因素,但缺乏系統(tǒng)的、客觀的基礎(chǔ)研究結(jié)果去解釋。全基因組外顯子測序(Whole-exome sequencing, WES)是指利用序列捕獲技術(shù)將探針覆蓋到的全基因組外顯子區(qū)域DNA捕捉并富集后再進行高通量測序的基因組分析方法,主要用于識別和研究與疾病、種群進化相關(guān)的編碼區(qū)域內(nèi)的變異。結(jié)合大量的公共數(shù)據(jù)庫提供的外顯子數(shù)據(jù),有利于更好地解釋所得變異結(jié)果之間的關(guān)聯(lián)和致病機理,特別適合于復(fù)雜先天性疾病的遺傳致病因素篩選。研究目的本研究以中國漢族人群一穴肛畸形患者為研究對象,擬在全基因組外顯子水平尋找與一穴肛畸形發(fā)病相關(guān)的基因突變。研究方法選取4例核心家系trio(編號分別為PC01/PC02/PC03/PC04)及8例獨立(PC05/PC06/PC07/PC08/PC09/PC10/PC11/PC12)的中國漢族人群PC患者,完整采集數(shù)據(jù)資料。排除環(huán)境因素影響后,采集術(shù)中標本剩余及外周靜脈血3-5ml,提取全基因組DNA。對上述樣本進行全集因組外顯子測序,所得數(shù)據(jù)采用嚴格的質(zhì)量控制及篩選策略(1000 Genome, ESP6500及ExAC數(shù)據(jù)庫等位基因頻率,SIFT/PolyPhen2保守型預(yù)測等),數(shù)據(jù)分析時考慮多種顯性遺傳及隱性遺傳模型的可能,并在KEGG,GO分析的基礎(chǔ)上結(jié)合基因表達數(shù)據(jù)庫,對數(shù)據(jù)及相關(guān)通路進行深入挖掘,以探索可能的致病突變。結(jié)果1、在顯性新發(fā)突變(de novo mutation)遺傳模型下,沒有發(fā)現(xiàn)可以導(dǎo)致編碼氨基酸改變的新發(fā)突變。2、在隱形遺傳模型下,在1例一穴肛畸形(PC01)和復(fù)發(fā)性自發(fā)胚胎停育(PC01母親)trio家系中,得到DNAH2基因的復(fù)合雜合非同義突變(p.Ser312Thr和p.Arg573Cys)和TULP4基因的復(fù)合雜合非同義突變(p.Arg490Trp和p.Pro1270Leu), DNAH2和TULP4參與初級纖毛(primary cilium)構(gòu)成,與脊柱動物胚胎早期發(fā)育有關(guān),有功能相關(guān)性。3、對12例一穴肛患兒測序數(shù)據(jù)進行罕見頻發(fā)位點篩選,篩選出的34個位點分別富集于PDE4DIP、OR2T27、ANKRD36、ZNF717、HLA-DQB2、GPRIN2、 OR9G1、HYDIN、MAP2K3、KCNJ18、NPEPPS、KIR2DL1及KIR3DL1等14個基因。其中,曾有報道KIR2DL1基因與胚胎發(fā)育有關(guān),我們將KIR2DL1基因選為候選基因,在KIR2DL1基因發(fā)現(xiàn)一個罕見的雜合非同義突(p.Thr91Lys/c.272CA)該突變在3例患兒(PC03,PC09,PC10),2例患兒母親(PC01,PC03)中均存在,考慮該突變位點可能與一穴肛畸形發(fā)病有相關(guān)性。結(jié)論DNAH2基因的復(fù)合雜合非同義突變(p.Ser312Thr和p.Arg573Cys)和TULP4基因的復(fù)合雜合非同義突變(p.Arg490Trp和p.Pro1270Leu)可能與一穴肛畸形發(fā)病、早期胚胎發(fā)育異常相關(guān),其遺傳模式可能為復(fù)雜隱形遺傳；患兒母親的非同義KIR2DL1基因突變(p.Thr91Lys/c.272CA)可能導(dǎo)致胚胎蛻膜層發(fā)育異常引起胚胎發(fā)育異常及畸形形成,具體的機制仍需進一步的動物基因敲除模型證實。
[Abstract]:The first part: the laparoscopic treatment of high background evaluation of cloacal malformation and systemic effect of cloacal malformation is a special type of congenital anorectal malformation is the most serious, rectum, urethra and vaginal dysplasia, merged into the common duct openings in Yin. Surgical treatment cloacal malformation has been a research hotspot in children in general surgery, Department of Urology, treatment not only to restore the normal anatomic structure of the anus, urethra and vagina, but also restore its corresponding function, complex operation, postoperative complications, poor prognosis. The laparoscopic technique has been widely used in anal atresia with urethral fistula, treatment of bladder fistula, but laparoscopic adjuvant treatment of cloacal malformation is still no systematic report and efficacy evaluation in detail. This study through the systematic evaluation of laparoscopic assisted anoplasty and urethra, The situation and prognosis of vaginoplasty operation, to explore the feasibility and effectiveness of laparoscopic technique in the treatment of cloacal malformations. Methods this study reviewed during 2005.11-2015.2 surgery for children with a high point of anorectal malformation in 26 cases, vaginal agenesis, vaginal surgery for bowel generation, are not included in this study. Laparoscopic assisted anoplasty and urethroplasty - vaginoplasty (LAARP group) 17 cases, among them, 2005.11-2014.6,12 patients were treated with conventional three incision laparoscopic surgery; 2014.6-2015.2,5 patients were treated by transumbilical single incision surgery; combined abdominal perineal anoplasty and urethroplasty - vaginal plastic surgery group (APPT group) 9 cases through. The operative age comparison between LAARP group and APPT group, sacral ratio (SR value), the common pipe length, duration of operation time, bleeding volume, postoperative hospitalization time, postoperative complications, postoperative defecation function index system 緇熷湴璇勪環(huán)涓ょ粍鐨勭枟鏁，

本文編號：1589990