本文選題：洋桔梗　切入點：ACC合酶　出處：《江蘇農(nóng)業(yè)學報》2017年02期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為了延長洋桔梗的花期,本研究通過農(nóng)桿菌介導法,以ACC合酶(ACS)基因干擾表達載體,對Double Mariachi Pink洋桔梗(Eustoma grandiflorum)的葉片外植體進行了轉(zhuǎn)化。經(jīng)過再生芽的篩選增殖培養(yǎng),在含有卡那霉素Km(15 mg/L)再生根篩選培養(yǎng)基中得到了46株抗性苗,其中11株經(jīng)GFP基因PCR鑒定為陽性。經(jīng)進一步的GFP基因RT-PCR鑒定,3株表達為陽性,并且其中2株經(jīng)GFP熒光檢測呈陽性。提取熒光陽性植株RNA,逆轉(zhuǎn)錄后,進行了ACS熒光定量PCR。結(jié)果表明,與未轉(zhuǎn)基因?qū)φ罩仓晗啾?轉(zhuǎn)基因植株ACS的相對表達量平均下降了63.17%。花期統(tǒng)計結(jié)果表明,ACS干擾表達載體轉(zhuǎn)化的洋桔梗植株花期比未轉(zhuǎn)基因植株對照延長了17 d。
[Abstract]:In order to prolong the flowering period of Platycodon grandiflorum, the leaf explants of Double Mariachi Pink Eustoma grandiflorum were transformed by Agrobacterium tumefaciens mediated by ACC synthase gene interference vector. 46 resistant seedlings were obtained in the culture medium containing kanamycin Km(15 mg / L, of which 11 were identified as positive by GFP gene PCR and 3 by GFP gene RT-PCR. Two of them were positive by GFP fluorescence detection. ACS fluorescence quantitative PCR was carried out by reverse transcription. The results showed that, compared with the non-transgenic control plants, two of them were compared with those of non-transgenic control plants. The relative expression of ACS in transgenic plants decreased by 63.17 on average, and the florescence statistics showed that the flowering period of Platycodon grandiflorum transformed by interference expression vector was 17 days longer than that of the control.
【作者單位】： 南京師范大學生命科學學院/江蘇省生物多樣性與生物技術重點實驗室;
【基金】：江蘇省自然科學基金重點項目(BK2001206)
【分類號】：S682.19

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本文編號：1584416