本文選題：受體　切入點：腫瘤壞死因子　出處：《福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報》2017年01期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的探討共同沉默誘騙受體3(DcR3)和表皮生長因子(EGFR)基因?qū)Y(jié)腸癌細(xì)胞株SW480生長增殖的影響和誘導(dǎo)凋亡作用研究。方法根據(jù)DcR3、EGFR的cDNA序列構(gòu)建3組針對DcR3和EGFR的siRNA,分別使用脂質(zhì)體Lipofectamine 2000轉(zhuǎn)染的方法將各個siRNA導(dǎo)入結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480中,48h后通過實時熒光定量PCR檢測各個siRNA對腫瘤靶基因mRNA表達(dá)的影響,采用Western-blot技術(shù)檢測其靶基因蛋白的表達(dá)水平,篩選出對人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞系中DcR3和EGFR抑制效果最強的siRNA,然后單獨或聯(lián)合轉(zhuǎn)染SW480細(xì)胞,MTT法檢測轉(zhuǎn)染后對結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480生長增殖活性的影響,流式細(xì)胞儀檢測對結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480的誘導(dǎo)凋亡作用。結(jié)果共同沉默DcR3和EGFR基因?qū)W480細(xì)胞增殖的抑制作用優(yōu)于DcR3或EGFR單基因沉默組(P0.05)。雙基因共沉默組、DcR3單基因沉默組、EGFR單基因沉默組轉(zhuǎn)染48h后轉(zhuǎn)染細(xì)胞的凋亡率分別為(20.1±1.7)%,(16.5±2.2)%及(15.9±1.3)%,差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論DcR3和EGFR雙基因共沉默能有效抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480的增殖并誘導(dǎo)其凋亡,且作用優(yōu)于DcR3或EGFR單基因沉默。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of co-silencing decoy receptor 3DcR3) and epidermal growth factor (EGFR3) gene on the proliferation and apoptosis of colon cancer cell line SW480. Methods according to the cDNA sequence of DcR3EGFR, three groups of siRNAs targeting DcR3 and EGFR were constructed, respectively. Lipofectamine Lipofectamine 2000 was used to transfect siRNA into colon cancer cell line SW480 for 48 h. The effect of siRNA on mRNA expression of tumor target gene was detected by real-time fluorescence quantitative PCR. The expression level of target gene protein was detected by Western-blot. The siRNAs which had the strongest inhibitory effect on DcR3 and EGFR in human colon cancer SW480 cell line were screened out, and then transfected with SW480 cells alone or in combination to detect the effect of transfection on the growth and proliferation of SW480 cell line. Results the inhibitory effect of co-silencing DcR3 and EGFR genes on the proliferation of SW480 cells was better than that of DcR3 or EGFR single gene silencing group (P 0.05). The apoptosis rates of the transfected cells were 20.1 鹵1.7% and 15.9 鹵1.3%, respectively, in the single gene silencing group after 48 h transfection. Conclusion the co-silencing of DcR3 and EGFR gene can effectively inhibit the proliferation and induce apoptosis of human colon cancer cell line SW480. And the effect is better than that of DcR3 or EGFR single gene silencing.
【作者單位】： 福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院胃腸外科二區(qū);
【基金】：福建省教育廳科技項目(JA10146) 福建省科技計劃重點項目(2014y0021)
【分類號】：R735.35

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本文編號：1581089