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‘黃冠’梨類甜蛋白編碼基因PbPR5的克隆及其表達(dá)特性分析

發(fā)布時(shí)間:2018-03-04 16:32

  本文選題:‘黃冠’梨 切入點(diǎn):類甜蛋白PbPR基因 出處:《果樹學(xué)報(bào)》2016年02期  論文類型:期刊論文


【摘要】:【目的】分離和克隆類甜蛋白基因Pb PR5,了解其在‘黃冠’梨不同組織、不同發(fā)育階段以及受到非生物脅迫和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理時(shí)的表達(dá)情況。【方法】以‘黃冠’梨(Pyrus bretschneideri‘Huangguan’)組培苗為試驗(yàn)材料,從水楊酸(salicylic acid,SA)處理的c DNA文庫中克隆獲得該基因全編碼區(qū)序列,命名為Pb PR5,對(duì)其進(jìn)行生物信息學(xué)分析,并研究該基因在鹽、聚乙二醇(EG6000)、SA和乙烯(ETH)處理后的表達(dá)情況;以12 a生‘黃冠’梨的葉片和果實(shí)為材料,探究該基因在葉片和果實(shí)不同發(fā)育階段的表達(dá)模式!窘Y(jié)果】Pb PR5的c DNA序列長(zhǎng)度為741 bp,編碼224個(gè)氨基酸殘基;該基因的基因組DNA序列長(zhǎng)度為813 bp,包含1個(gè)內(nèi)含子。生物信息學(xué)分析表明,Pb PR5蛋白與其他植物PR5基因編碼的氨基酸序列相似性較高。實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析表明:Pb PR5基因在‘黃冠’梨組培苗的根,莖,葉中均能表達(dá),其中根部的表達(dá)量高于莖和葉;鹽和干旱脅迫誘導(dǎo)了該基因表達(dá),根和莖中的表達(dá)高峰均出現(xiàn)在處理后6 h,葉在鹽脅迫后24 h和干旱后12 h出現(xiàn)表達(dá)高峰;SA和乙烯也誘導(dǎo)了該基因在葉片中的表達(dá)。在不同發(fā)育階段的葉片中,老葉表達(dá)量最高,成熟葉次之,幼葉中不表達(dá);在不同發(fā)育階段的果實(shí)中,成熟果實(shí)中表達(dá)量最高,幼果期和膨大期果實(shí)表達(dá)量較低!窘Y(jié)論】Pb PR5基因在‘黃冠’梨各組織中非組成型表達(dá),并且在‘黃冠’梨抵御生物和非生物脅迫過程中可能具有重要的生物學(xué)功能。
[Abstract]:[objective] to isolate and clone the sweet protein-like gene Pb PR5 in different tissues of 'Huangguan' pear. Expression in different developmental stages and under abiotic stress and plant growth regulator treatment. [methods] the tissue culture seedlings of 'Pyrus bretschneider Huangguan' were used as experimental materials. The full coding region of the gene, named Pb PR5, was cloned from the c DNA library treated with salicylic acid. The sequence was analyzed by bioinformatics, and the expression of the gene was studied after salt, polyethylene glycol EG6000 (SA) and ethylenediol (DNA) treatment. The expression pattern of this gene in leaves and fruits of 12-year-old 'Huangguan' pear was studied. [results] the c DNA sequence of Pb PR5 was 741bp, encoding 224 amino acid residues. The length of genomic DNA sequence of this gene is 813 BP, which contains an intron. Bioinformatics analysis shows that the amino acid sequence of PR5 gene is similar to that of other plant PR5 gene. Real-time fluorescence quantitative PCR analysis shows that the amino acid sequence of PR5 gene is similar to that of other plants. PR5 gene in the roots of 'Huangguan' pear plantlets in tissue culture, Both stem and leaf could be expressed, and the expression in root was higher than that in stem and leaf. Salt and drought stress induced the expression of the gene. The highest expression peaks in roots and stems occurred at 6 h after treatment, and the peak expression peaks of SA and ethylene in leaves at 24 h after salt stress and 12 h after drought also induced the expression of the gene in leaves. In the leaves of different developmental stages, the highest expression level was found in the old leaves. The expression of Pb PR5 gene was the highest in mature fruits and low in young and expanded fruits. [conclusion] Pb PR5 gene was expressed in all tissues of 'Huangguan' pear. And it may have important biological function in the process of resisting biological and abiotic stress.
【作者單位】: 江蘇徐淮地區(qū)徐州農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所;江蘇徐州豐縣大沙河果園;
【基金】:江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金[CX(15)1023]
【分類號(hào)】:S661.2

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1566450

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