本文關(guān)鍵詞：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)在轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)中的應(yīng)用研究進(jìn)展，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

第2 8卷第 1期 2 0 1 3年1月

內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版 ) J o u r n a l o f I n n e r Mo n g o l i a Un i v e r s i t y f o r Na t i o n li a t i e s

Vo I . 2 8 N o . 1

J a n . 2 0 1 3

實(shí)時(shí)熒光定量 P CR技術(shù)在轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)中的應(yīng)用研究進(jìn)展 倪娜，，張智勇L ,李國(guó)瑞，夏春麗，李華，郭闖 ( 1內(nèi)蒙古民族大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古通遼 0 2 8 0 4 3; 2 .通遼市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，內(nèi)蒙古通遼 0 2 8 0 1 5 )

[摘要]隨著轉(zhuǎn)基因食品的快速發(fā)展，轉(zhuǎn)基因食品的大規(guī)模商業(yè)化引起了對(duì)安全性問題的廣泛爭(zhēng)議 .為了對(duì)轉(zhuǎn) 基因食品作出綜合的評(píng)價(jià)，建立靈敏、快速、準(zhǔn)確、高通量的檢測(cè)方法十分必要.本文綜述了實(shí)時(shí)熒光定量 P C R 技術(shù)的基本原理、優(yōu)缺點(diǎn)及其在轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)中的應(yīng)用與研究進(jìn)展，并探討了該技術(shù)存在的問題和應(yīng)用前 景.

【關(guān)鍵詞]轉(zhuǎn)基因食品；實(shí)時(shí)熒光定量 P C R;檢測(cè)方法[中圖分類號(hào)] T S 2 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1 6 7 1— 0 1 8 5 ( 2 0 1 3 ) 0 1— 0 0 6 4— 0 7

De v e l o p me n t o f R e a l - T i me F l u o r e s c e n t Qu a n t i t a t i v e PCR i n Ge n e t i c a l l y Mo d i ie f d Fo o d De t e c t i o n NI Na , Z HANG Z h i - y o n g, L I Gu o— ni r , XI A C h u n - l i , L I Hu a , GUO C h u ng a

( 1 . C o l l e g e o f L i f e S c i e n c e s, I n n e r Mo n g o l i a U n i v e r s i t y f o r t h e N a t i o n a l i t i e s, T o n g l i a o 0 2 8 0 4 3, C h i n a; 2 . T o n g l i a o A c a d e m y o f A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s, T o n g l i a o 0 2 8 0 1 5, C h i n a )

Ab s t r a c t: Wi t h t h e r a p i d d e v e

l o p me n t o f g e n e t i c a l l y m o d i i f e d f o o d s ( G MF ), a c o n s i d e r a b l e c o n t r o v e r s y w a s d i s p u t e d o v e r t h e s a f e t y p r o b l e m o f GMF b e c a u s e o f i t s l a r g e s c le a c o mme r c i li a z a t i o n . T o e v lu a a t e t h e s fe a t y o f GMF s y n he t t i c a l— l y, a s e n s i t i v e,r a p i d, a c c u r a t e, h i g h - hr t o u g h p u t q u a n t i t a t i v e a s s a y wa s n e c e s s a r y . I n t h i s p a p e r, r e s e a r c h p r o g r e s s o f

t h e f u n d a me n t ls a, a d v a n t a g e s a n d d i s a d v nt a a g e s o f r e a l— t i me l f u o r e s c e n t q u nt a i t a t i v e P C R a p p l i e d t o GMF d e t e c t i o n i f e l d wa s r e v i e we d . Al s o, he t e x i s t i n g p r o b l e ms a n d p r a c t i c l a p r o s p e c t o f t h i s t e c h n o l o g y we r e e x p l o r e d . Ke y wo r d s: Ge n e t i c ll a y mo d i i f e d f o o d; Re a l— t i me q u nt a i t a t i v e P CR; De t e c t i o n me ho t d

1 引言 2 0世紀(jì)7 0年代以來，應(yīng)用于食品資源改造的轉(zhuǎn)基因技術(shù)發(fā)展十分迅速.人們使用基因工程技術(shù)，將優(yōu)良的外源基因轉(zhuǎn)

入到生物體內(nèi)，通過改造其遺傳物質(zhì)使其性狀、營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)等向人們所需要的目標(biāo)轉(zhuǎn)變，得到所謂的轉(zhuǎn)基因生物；來源于轉(zhuǎn) 基因生物及其衍生產(chǎn)品的食品即為轉(zhuǎn)基因食品 ( G e n e t i c l a l y Mo d i i f e d F o o d, G MF ) .

截至 2 0 1 1年，全球

轉(zhuǎn)基因作物的種植面積已由1 9 9 6年的 1 7 0萬(wàn)公頃增長(zhǎng)至 1 . 6億公頃，這個(gè)增長(zhǎng)速度在現(xiàn)代農(nóng)業(yè)史上是前所未有的… .轉(zhuǎn)基因技術(shù)的快速發(fā)展一方面展現(xiàn)了先進(jìn)科技對(duì)生產(chǎn)力的巨大推動(dòng)作用，另一方面也引發(fā)了關(guān)于轉(zhuǎn)基因 食品安全性問題的爭(zhēng)論 . 為了能夠有效地評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)基因食品的安全性，對(duì)轉(zhuǎn)基因食品進(jìn)行標(biāo)識(shí)管理，并且建立靈敏、快速、準(zhǔn)確的方法對(duì)其含有

的轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行檢測(cè)，成為了當(dāng)前研究的熱點(diǎn)問題 .目前，轉(zhuǎn)基因食品的檢測(cè)方法主要有兩類：一類是對(duì)外源基因的表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)，如酶聯(lián)免疫法 ( E uS A )、蛋白質(zhì)印跡法 ( We s t e r n b l o t )、試紙條法 ( L a t e r lF a l o wS t r i p )等；另一類是直接對(duì)外源基因序列的檢測(cè)，主要是以核酸為基礎(chǔ)的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)法 ( P o l y m e r s a e C h a i n R e a c t i o n, P C R ) . 近年來，結(jié)合了P C R和雜交探針兩者優(yōu)點(diǎn)的實(shí)時(shí)熒光定量 P C R技術(shù) ( R e a l— t i meQ u nt a i t a t i v eP o l y me r a s e C h a i nR e a c - t i o n, R Q— P C R )發(fā)展十分迅速.通過實(shí)時(shí)分析 P C R過程中熒光信號(hào)的變化，便能獲得樣品中 D N A模板含量的定量結(jié)果，其

作者簡(jiǎn)介：倪娜，內(nèi)蒙古民族大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院助教

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