本文關(guān)鍵詞： 喉鱗狀細(xì)胞癌 miR-129-2基因 甲基化　出處：《鄭州大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：喉癌是頭頸部最常見的腫瘤,喉癌的發(fā)生發(fā)展目前尚無明確病因,可能是由下列多種因素共同作用導(dǎo)致,主要有吸煙、飲酒、病毒感染、性激素、職業(yè)暴露等有關(guān)。喉鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生是個(gè)多因素互相作用并共同參與、長期的、復(fù)雜的連續(xù)過程。盡管人們對(duì)喉癌的影響因素和分子機(jī)制有了一定的了解,喉癌治療的五年生存率仍低于50%,喉癌的最常見病理分型為鱗狀細(xì)胞癌,喉癌的早期診斷及喉癌復(fù)發(fā)的早期判斷對(duì)喉鱗癌的治療及預(yù)后至關(guān)重要,而目前人們對(duì)于相關(guān)的分子機(jī)理及分子標(biāo)志的認(rèn)識(shí)還很有限�；蚣谆潜碛^遺傳學(xué)中的一種,在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中,幾乎所有的DNA甲基化都發(fā)生在CpG島胞嘧啶,研究證實(shí),啟動(dòng)子區(qū)CpG島異常甲基化是最多見的生物學(xué)標(biāo)志之一,可能對(duì)癌癥治療包括早期癌癥檢測(cè),表觀遺傳學(xué)腫瘤分類,預(yù)測(cè)腫瘤預(yù)后,治療干預(yù)等有很大幫助。研究發(fā)現(xiàn),miRNAs與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展有密切的關(guān)系。喉癌組織中有多種miRNAs異常表達(dá)。MicroRNAs是一系列小的非編碼RNAs,通過調(diào)節(jié)目標(biāo)基因的表達(dá)而引起mRNA的表達(dá)下降或抑制mRNA轉(zhuǎn)錄。miR-129-2是微小RNA中的一員,其基因位于染色體11p11.2。己有研究報(bào)道,miR-129-2的異常表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌、膀胱癌、胃癌等許多人類腫瘤的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)。但是miR-129-2與LSCC關(guān)系的研究卻較為少見.為了深入理解喉鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生及發(fā)展的分子生物學(xué)機(jī)理,尋找鑒定相應(yīng)的分子生物學(xué)指標(biāo)志,為進(jìn)一步治療喉癌奠定基礎(chǔ)。本文將對(duì)miR-129-2與喉鱗癌的關(guān)系作進(jìn)一步的研究。目的1.研究miR-129-2基因啟動(dòng)子在喉癌組織和匹配癌旁組織,以及喉癌細(xì)胞系的甲基化狀態(tài)。2.研究miR-129-2在喉癌組織的表達(dá)水平及miR-129-2甲基化與其表達(dá)水平的關(guān)系。3.miR-129-2過表達(dá)對(duì)喉癌細(xì)胞增殖的影響。方法采用甲基化敏感性特異性聚合酶鏈反應(yīng)(msre-qpcr)的方法測(cè)定喉癌細(xì)胞系hep-2細(xì)胞和29對(duì)喉癌組織和癌旁組織中mir-129-2基因的甲基化水平。每一標(biāo)本的hm(甲基化強(qiáng)度)≥10%定義為發(fā)生甲基化。0%hm10%定義為非甲基化。采用熒光定量pcr方法測(cè)定喉癌患者癌組織及匹配的癌旁組織中mir-129-2基因的mrna表達(dá)水平,以β-actin作為內(nèi)參基因。通過測(cè)定樣本中目的基因mir-129-2模板的ct值來反應(yīng)模板的含量。對(duì)每一個(gè)樣本,用Δct(ctmir129-2-ctβ-actin)值表示目的基因與內(nèi)參基因間的ct差值。應(yīng)用去甲基化藥物分析甲基化對(duì)喉癌細(xì)胞中mir-129-2基因表達(dá)的影響。最后利用mtt實(shí)驗(yàn)在喉癌細(xì)胞系中驗(yàn)證mir-129-2對(duì)腫瘤相關(guān)特性的影響。結(jié)果1.熒光定量pcr檢測(cè)甲基化結(jié)果結(jié)果顯示,mir-129-2啟動(dòng)子區(qū)在喉癌細(xì)胞系hep-2細(xì)胞中發(fā)生了甲基化。在喉癌組織中mir-129-2甲基化頻率為58.62%(17/29),在癌旁組織未發(fā)生mir-129-2甲基化.2.mir-129-2在喉癌組織及癌旁組織的表達(dá)水平喉癌組織中mir-129-2表達(dá)水平低于癌旁組織(p0.05).3.喉癌細(xì)胞系去甲基化處理結(jié)果hep-2細(xì)胞系在去甲基化和去乙�；幬锾幚砗笈c空白對(duì)照相比,mir-129-2的表達(dá)明顯增高。4.mtt實(shí)驗(yàn)結(jié)果hep-2細(xì)胞中過表達(dá)mir-129-2基因后,與轉(zhuǎn)入空載質(zhì)粒對(duì)比,細(xì)胞的生長明顯受到抑制。結(jié)論1.mir-129-2在喉癌組織和喉癌細(xì)胞系有明顯的甲基化。2.mir-129-2在喉癌組織表達(dá)降低。3.mir-129-2的表達(dá)降低與基因啟動(dòng)子甲基化有關(guān)。4.miR-129-2基因過表達(dá)可抑制細(xì)胞增殖,說明miR129-2在喉癌中起抑癌基因的作用。
[Abstract]:The expression of miR - 129 - 2 in laryngeal squamous cell carcinoma is closely related to the occurrence and development of laryngeal squamous cell carcinoma .

【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R739.65
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本文編號(hào)：1541868