本文關(guān)鍵詞： MHC I區(qū)基因 半定量PCR 組織表達(dá) 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 草魚　出處：《華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為全面了解草魚MHC I區(qū)基因及其表達(dá)特征,利用已知斑馬魚MHC I區(qū)基因序列,通過本地Blast得到草魚MHC I區(qū)的部分基因序列。采用RT-PCR技術(shù),檢測(cè)MHC I區(qū)BRD2、KNSL2、RXRB、TAPBP、FABGL、MHC Ia、PSMB9以及TAP2等8個(gè)基因在健康草魚各組織的表達(dá)水平。結(jié)果表明,除FABGL在腎臟表達(dá)量最高外,其他基因都在血液中的表達(dá)量最高。通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)草魚在嗜水氣單孢菌感染后4、12、24、48及96h,MHC I區(qū)免疫相關(guān)基因在脾臟和腎臟中的表達(dá)情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn),BRD2表達(dá)量分別在12h和24h在腎臟和脾臟中達(dá)到最高;MHC Ia表達(dá)量在脾臟和腎臟中都先上升后下降,并都在24h達(dá)最大值;PSMB9表達(dá)量在脾臟先上升后下降,在12h達(dá)最大值,在腎臟中則先下降后上升,在24h達(dá)最大值;TAP2在脾臟和腎臟中整體呈先下降后上升的趨勢(shì),在24h都達(dá)最大值,并最后都回調(diào)至正常范圍。BRD2、MHC Ia、PSMB9、TAP2的表達(dá)量在攻毒后都有顯著性變化,表明這4個(gè)基因在草魚免疫方面具有重要的作用。
[Abstract]:In order to fully understand the MHC I gene and its expression characteristics of grass carp, using known MHC I gene sequence of zebrafish, partial gene sequence of MHC I region of grass carp was obtained by local Blast. RT-PCR technique was used. The expression levels of BRD2OKNSL2RXRBTP-FABGLMHCMHC IaHPSMB9 and TAP2 in the tissues of healthy grass carp were detected. The results showed that the expression of FABGL was the highest in the kidney. The expression of other genes was the highest in blood. The expression of MHC I immune-related genes in spleen and kidney of grass carp was detected by real-time fluorescence quantitative PCR. The results showed that the expression of BRD2 was detected in spleen and kidney of grass carp after infection with Aeromonas hydrophila. The expression of MHC Ia in kidney and spleen reached the highest level at 12 h and 24 h, respectively. The expression of MHC Ia in spleen and kidney increased first and then decreased. The expression of PSMB9 increased first in the spleen and then decreased in the spleen, reached the maximum at 12 h, then increased in the kidney, and reached the maximum at 24 h. The total expression of TAP2 decreased first and then increased in the spleen and kidney at 24 h, and reached the maximum at 24 h. In the end, the expression of .BRD2MHC IaMMB9 / TAP2 was significantly changed after the attack, indicating that these four genes play an important role in grass carp immunity.
【作者單位】： 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院/農(nóng)業(yè)部淡水生物繁育重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/淡水水產(chǎn)健康養(yǎng)殖湖北省協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：中央高�；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)(2662015PY041;2015PY134)
【分類號(hào)】：S917.4

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1539655