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冠突曲霉產(chǎn)孢相關(guān)基因的克隆及功能分析

發(fā)布時(shí)間:2018-02-25 05:29

  本文關(guān)鍵詞: 冠突曲霉 有性發(fā)育 Tail-PCR NDT 出處:《基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)》2017年09期  論文類型:期刊論文


【摘要】:為探究冠突曲霉有性產(chǎn)孢調(diào)控的相關(guān)機(jī)制,從已構(gòu)建的T-DNA隨機(jī)插入突變體庫(kù)中選取有性產(chǎn)孢突變株,采用Southern雜交鑒定T-DNA為單拷貝插入,并用Tail-PCR技術(shù)擴(kuò)增獲得T-DNA插入位點(diǎn)側(cè)翼序列,分離獲得突變基因。序列分析表明,該基因位于冠突曲霉基因組scaffold 7上,開放閱讀框2 511 bp,含有4個(gè)內(nèi)含子,預(yù)測(cè)編碼666個(gè)氨基酸,含有NDT80_Pho G蛋白質(zhì)超級(jí)家族保守結(jié)構(gòu)域。BLASTp結(jié)果表明,該預(yù)測(cè)蛋白與Eurotium rubrum p53-like轉(zhuǎn)錄因子(EYE95652.1)相似性最高,identity=89%。顯微觀察發(fā)現(xiàn)T-DNA的插入影響了有性產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)的發(fā)育。本實(shí)驗(yàn)為進(jìn)一步研究該基因在有性產(chǎn)孢過(guò)程中的分子功能及可能參與的調(diào)控途徑奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to explore the mechanism of regulation of sexual sporulation in Aspergillus coronatum, a single copy of T-DNA was identified by Southern hybridization from the constructed T-DNA random insertion mutant library. The flanking sequence of T-DNA insertion site was amplified by Tail-PCR, and the mutant gene was isolated. The sequence analysis showed that the gene was located on the genomic scaffold 7 of Aspergillus coronatum, open reading frame 2511 BP, containing 4 introns and encoding 666 amino acids. The conserved domain of superfamily containing NDT80_Pho G protein. BLASTp showed that, The predicted protein has the highest similarity with Eurotium rubrum p53-like transcription factor EYE95652.1). Microscopic observation shows that the insertion of T-DNA affects the development of sexual sporulation structure. In order to further study the molecular function of this gene in the process of sexual sporulation. To be able to participate in the regulation of the way to lay the foundation.
【作者單位】: 貴州大學(xué);貴州省生物技術(shù)研究所;貴州省農(nóng)業(yè)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金“冠突曲霉有性產(chǎn)孢新基因的篩選及其功能驗(yàn)證”(31660021) 貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院自主創(chuàng)新專項(xiàng)“冠突散囊菌比較基因組學(xué)及功能基因組學(xué)研究”(2014)004 貴州省農(nóng)科院與貴州省科技廳聯(lián)合基金項(xiàng)目(黔科合LH字(2014)7693號(hào)) 貴州大學(xué)研究生創(chuàng)新基金“冠突散囊菌產(chǎn)孢相關(guān)基因的克隆及功能分析”共同資助
【分類號(hào)】:Q78;Q93

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本文編號(hào):1533205

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