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日本鰻鱺肝臟表達(dá)抗菌肽2基因的克隆與表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2018-02-21 17:01

  本文關(guān)鍵詞: 抗菌肽 LEAP- 日本鰻鱺 遲緩愛德華氏菌 出處:《水生生物學(xué)報(bào)》2016年02期  論文類型:期刊論文


【摘要】:為探討魚類抗菌肽基因的生物學(xué)功能,研究應(yīng)用RACE方法克隆獲得了日本鰻鱺(Anguilla japonica)肝臟表達(dá)抗菌肽2基因(Liver-Expressed Antimicrobial Peptide 2,LEAP-2),即AJLEAP-2的cDNA序列,全長為450 bp,開放閱讀框編碼89個(gè)氨基酸。其成熟肽含有LEAP-2保守基序"C-X5-C-X4-C-X4-C"。AJLEAP-2基因組結(jié)構(gòu)與其他脊椎動物L(fēng)EAP-2相同,都包含有三個(gè)外顯子。利用熒光定量PCR檢測了AJLEAP-2在日本鰻鱺不同組織/器官中的表達(dá),發(fā)現(xiàn)其轉(zhuǎn)錄子在肝臟中表達(dá)量最高,是內(nèi)參基因(β-acHn)的6倍;其次是腸道,但其表達(dá)量僅為肝臟的1/130。此外,還檢測了AJLEAP-2在日本鰻鱺玻璃鰻(Glass eel)階段的轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平,結(jié)果顯示,玻璃鰻中AJLEAP-2的轉(zhuǎn)錄表達(dá)量僅低于黑仔期的肝臟,為黑仔鰻腸道表達(dá)量的2倍。LPS和遲緩愛德華菌(Edwardsiella tarda)刺激能顯著上調(diào)鰻鱺血液中AJLEAP-2的轉(zhuǎn)錄表達(dá),刺激16h后上調(diào)倍數(shù)最高,分別為對照組的86倍和12倍。此外,LPS刺激72h和E tarda刺激8h后,腸道中AJLEAP-2顯著上調(diào)表達(dá)(P0.05),為對照組的8倍。Poly I:C刺激24h后,血液中AJLEAP-2轉(zhuǎn)錄表達(dá)顯著下調(diào)。結(jié)果表明,AJLEAP-2在日本鰻鱺抗細(xì)菌感染過程中起重要的作用。
[Abstract]:In order to study the biological function of antimicrobial peptide gene in fish, RACE method was used to clone Anguilla japonica (Anguilla japonica) liver expressing antimicrobial peptide 2 gene, the cDNA sequence of AJLEAP-2 was obtained. The mature peptide contains LEAP-2 conserved motif "C-X5-C-X4-C-X4-C" .AJLEAP-2 has the same genomic structure as other vertebrate LEAP-2. Using fluorescent quantitative PCR to detect the expression of AJLEAP-2 in different tissues / organs of Japanese eel (Anguilla japonica), it was found that the expression of AJLEAP-2 was the highest in the liver, six times that of 尾 -acHnn. the second was intestinal tract. But its expression was only 1 / 130 of that in the liver. In addition, the transcriptional expression of AJLEAP-2 in the glass eel of Japanese eel (Anguilla japonica) was detected. The results showed that the transcriptional expression of AJLEAP-2 in the glass eel was only lower than that in the black eel. LPs and Edwardsiella tarda stimulated eels significantly up-regulated the transcription of AJLEAP-2 in the blood of Anguilla japonica, which was the highest after 16 hours of stimulation. In addition, after 72 h and 8 h of E tarda stimulation, the expression of AJLEAP-2 was significantly up-regulated in the intestine, which was 8 times as much as that of the control group after 24 hours of stimulation with 路Poly I: C. The results showed that AJLEAP-2 played an important role in the process of anti-bacterial infection of Japanese eel (Anguilla japonica).
【作者單位】: 集美大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院;鰻鱺現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)技術(shù)教育部工程研究中心;中國科學(xué)院水生生物研究所;福建省海洋生物資源開發(fā)利用協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31172438和U1205123) 福建省自然科學(xué)基金(2012706008,201311180002和2014705042) 教育部留學(xué)回國人員科研啟動金資助~~
【分類號】:S917.4

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號:1522393


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