本文關(guān)鍵詞： 卵巢腫瘤 LIM同源盒基因 細(xì)胞增殖 細(xì)胞遷移 腫瘤侵襲　出處：《第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報》2017年06期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的探討LIM同源盒基因8(Lhx8)對卵巢癌細(xì)胞株SKOV3增殖、轉(zhuǎn)移和侵襲的影響。方法采用Lhx8過表達(dá)慢病毒(LV-Lhx8)轉(zhuǎn)染卵巢癌細(xì)胞株SKOV3構(gòu)建過表達(dá)模型;設(shè)陰性對照慢病毒(LV-NC)組通過Lipofectamine 2000轉(zhuǎn)染Lhx8-siRNA構(gòu)建細(xì)胞干擾模型并設(shè)陰性對照序列(FAM-siRNA;NC)組;野生(WT)組細(xì)胞僅給予等量不含病毒或任何干擾片段的轉(zhuǎn)染試劑。通過免疫熒光、蛋白質(zhì)印跡法和qPCR驗證過表達(dá)和干擾效果。采用EDU和細(xì)胞周期實驗檢測過表達(dá)或干擾Lhx8后細(xì)胞的增殖能力;采用Transwell和劃痕實驗分別檢測轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的遷移和侵襲能力。結(jié)果 Lhx8過表達(dá)組SKOV3細(xì)胞中Lhx8的表達(dá)高于LV-NC和WT組(P0.01),干擾后Lhx8的mRNA和蛋白表達(dá)均降低,與NC和WT組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。與WT和LV-NC組相比,Lhx8過表達(dá)抑制SKOV3細(xì)胞的增殖(P0.01),而干擾Lhx8后其增殖能力增加(P0.01);細(xì)胞周期實驗結(jié)果示過表達(dá)Lhx8能夠增加進入G0/G1期的細(xì)胞數(shù)目,從而抑制細(xì)胞增殖(P0.01),干擾Lhx8表達(dá)后進入S期的細(xì)胞數(shù)目多于WT和NC組(P0.01)。劃痕和Transwell實驗結(jié)果示SKOV3細(xì)胞過表達(dá)Lhx8后其遷移和侵襲能力均低于WT和LV-NC組(P0.01),干擾Lhx8表達(dá)后細(xì)胞的遷移和侵襲能力均高于WT和NC組(P0.01)。SKOV3細(xì)胞過表達(dá)Lhx8后基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表達(dá)均低于WT和LV-NC組(P0.01),干擾Lhx8后MMP-2、MMP-9表達(dá)均高于WT和NC組(P0.01)。結(jié)論 Lhx8能夠抑制SKOV3細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲,同時能夠下調(diào)MMP-2和MMP-9的表達(dá)。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of LIM homologous box gene 8 (Lhx8) on the proliferation, metastasis and invasion of ovarian cancer cell line SKOV3. Methods the overexpression model of ovarian cancer cell line SKOV3 was constructed by Lhx8 overexpression lentivirus LV-Lhx8. The negative control lentivirus lentivirus LV-NCgroup was used to construct the cell interference model by Lipofectamine 2000 transfection and the negative control sequence was set up to establish the FAM-siRNA-NCCgroup, while the wild control group was only given the same amount of transfection reagent without virus or any interference fragments. The effects of overexpression and interference were verified by Western blot and qPCR. EDU and cell cycle assay were used to detect the proliferative ability of cells after overexpression or interference with Lhx8. Results the expression of Lhx8 in SKOV3 cells in Lhx8 overexpression group was higher than that in LV-NC and WT groups, and the expression of mRNA and protein in Lhx8 decreased after interference. Compared with NC and WT groups, the overexpression of Lhx8 inhibited the proliferation of SKOV3 cells, but increased the proliferation ability of SKOV3 cells after interfering with Lhx8. The results of cell cycle test showed that overexpression of Lhx8 could increase the number of cells entering G0 / G1 phase. The number of cells entering S phase after interfering with Lhx8 expression was higher than that in WT and NC groups. The results of scratch and Transwell experiments showed that the migration and invasion ability of SKOV3 cells after overexpression of Lhx8 was lower than that of WT and LV-NC groups, and that after interfering with Lhx8 expression, the migration and invasion ability of SKOV3 cells was lower than that of WT and LV-NC groups. The expression of matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) and matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) and matrix metalloproteinase (MMP-9) in WT and LV-NC groups were lower than those in WT and LV-NC groups, and the expression of MMP-2 and MMP-9 in WT and NC groups were higher than those in WT and NC groups. Conclusion Lhx8 can inhibit the proliferation of SKOV3 cells. Migration and invasion can down-regulate the expression of MMP-2 and MMP-9.
【作者單位】： 上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院南院婦產(chǎn)科;南通大學(xué)醫(yī)學(xué)院解剖教研室;上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【分類號】：R737.31

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本文編號：1512143