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玉米脫氧麥根酸分泌通道蛋白基因YS3啟動(dòng)子的克隆與啟動(dòng)活性分析

發(fā)布時(shí)間:2018-02-14 07:22

  本文關(guān)鍵詞: 玉米 脫氧麥根酸 YS基因 啟動(dòng)子 GUS基因 出處:《遺傳》2016年06期  論文類型:期刊論文


【摘要】:缺鐵是世界范圍內(nèi)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)面臨的嚴(yán)重問(wèn)題,玉米通過(guò)分泌脫氧麥根酸(2’-deoxymugineic acid,DMA)吸收利用土壤中的難溶性鐵。為探明玉米DMA分泌通道蛋白基因YS3的表達(dá)和調(diào)控機(jī)制,本文通過(guò)克隆獲得長(zhǎng)為2813 bp的YS3基因啟動(dòng)子,該序列含有大量TATA-box、CAAT-box等啟動(dòng)子基本元件,以及光響應(yīng)、激素調(diào)控等多個(gè)順式調(diào)控元件;構(gòu)建YS3啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)GUS基因的植物表達(dá)重組載體p CAMBIA-YS3GUS,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化擬南芥,獲得p YS3::GUS轉(zhuǎn)基因植株,對(duì)轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行GUS組織化學(xué)染色,并通過(guò)石蠟切片技術(shù)對(duì)轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行組織觀察,分析p YS3::GUS轉(zhuǎn)基因植株中YS3基因啟動(dòng)子的活性。結(jié)果表明,YS3啟動(dòng)子主要驅(qū)動(dòng)GUS基因在擬南芥根部表達(dá),且主要集中在根部表皮細(xì)胞,機(jī)械損傷可激發(fā)YS3啟動(dòng)子活性,驅(qū)動(dòng)GUS基因在損傷臨近部位表達(dá)。本研究對(duì)于理解玉米DMA分泌的分子調(diào)控機(jī)理具有重要意義。
[Abstract]:Iron deficiency is a serious problem in agricultural production all over the world. Maize absorbs and uses insoluble iron in soil by secreting deoxymugineic acid DMAs. In order to investigate the expression and regulation mechanism of DMA secretory channel protein gene YS3 in maize, In this paper, a 2813 BP YS3 promoter was cloned, which contains a large number of basic promoter elements such as TATA-box CAAT-box, photo-response, hormone regulation and many other cis-regulatory elements. The plant expression vector pCAMBIA-YS3GUSwas constructed by YS3 promoter, and transformed into Arabidopsis thaliana by Agrobacterium tumefaciens. The transgenic plants were obtained by GUS histochemical staining. The tissue of transgenic plants was observed by paraffin section technique, and the activity of YS3 gene promoter in p YS3::GUS transgenic plants was analyzed. The results showed that YS3 promoter mainly drives the expression of GUS gene in Arabidopsis thaliana root. Mechanical injury can stimulate the activity of YS3 promoter and drive the expression of GUS gene in the vicinity of injury. This study is of great significance in understanding the molecular regulation mechanism of DMA secretion in maize.
【作者單位】: 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院作物生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào):31101160,31271808) 山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)崗位專家項(xiàng)目(編號(hào):SDAIT-01-022-02) 山東省博士后創(chuàng)新項(xiàng)目專項(xiàng)資金(編號(hào):201102038)資助~~
【分類號(hào)】:Q943.2;S513

【參考文獻(xiàn)】

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1 溫大興;玉米種子純度快速分子檢測(cè)技術(shù)研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

2 董炳雪;玉米自交系苗期麥根酸分泌特性及其與SSR標(biāo)記的關(guān)聯(lián)分析[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

【共引文獻(xiàn)】

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2 尹朝華;玉米脫氧麥根酸分泌通道蛋白基因YS3表達(dá)模式研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

3 鄭建鵬;向日葵種子純度室內(nèi)快速檢測(cè)方法的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

4 龍文靖;玉米苗期耐低鐵品種篩選及其機(jī)理研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

【相似文獻(xiàn)】

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2 李志新;曹雙河;張相岐;張懷剛;;偽鵝觀草高分子量麥谷蛋白基因啟動(dòng)子的克隆[J];長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)(自科版)農(nóng)學(xué)卷;2007年02期

3 高剛;魯艷芹;韓金祥;趙麗;;雙啟動(dòng)子對(duì)增強(qiáng)型綠色熒光蛋白表達(dá)的影響[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2009年10期

4 郝迪,

本文編號(hào):1510172


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