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Klotho基因轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細胞移植對慢性心力衰竭大鼠心肌纖維化的影響

發(fā)布時間:2018-02-11 08:10

  本文關鍵詞: Klotho基因骨髓間充質(zhì)干細胞 心力衰竭 心肌纖維化 出處:《中國動脈硬化雜志》2017年06期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的觀察Klotho基因(抗衰老基因)修飾的骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSC)移植對慢性心力衰竭大鼠心肌纖維化的影響。方法分離、培養(yǎng)、擴增大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞。慢病毒介導Klotho轉(zhuǎn)染至BMSC中,逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測BMSC中Klotho mRNA的表達。制備大鼠慢性心力衰竭模型,隨機分為正常對照組、模型對照組、增強型綠色熒光蛋白-BMSC組(EGFP-BMSC組)、EGFP-Klotho-BMSC組。細胞移植28天后多普勒超聲檢測心功能,熒光顯微鏡觀察細胞存活及分布,HE染色觀察心肌組織病理變化。Masson染色檢測心肌膠原沉積含量和心肌纖維化程度。結果 Klotho轉(zhuǎn)染BMSC后,BMSC中Klotho mRNA表達明顯增多(P0.05)。移植28天后超聲心動圖結果顯示,與EGFP-BMSC組及模型對照組比較,EGFP-Klotho-BMSC組左心室射血分數(shù)(LVEF)提高(P0.05)。EGFP-BMSC組及EGFP-Klotho-BMSC組心肌纖維化程度較模型對照組減輕(P0.05),EGFP-KlothoBMSC組較EGFP-BMSC組心肌纖維化改善更為明顯(P0.05)。結論 Klotho基因聯(lián)合BMSC治療可進一步抑制心肌纖維化,減少心肌間質(zhì)膠原沉積,改善心功能。
[Abstract]:Objective to observe the effect of transplantation of bone marrow mesenchymal stem cells modified with Klotho gene on myocardial fibrosis in rats with chronic heart failure. Rat bone marrow mesenchymal stem cells were amplified. Lentivirus-mediated Klotho was transfected into BMSC, and the expression of Klotho mRNA in BMSC was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). The rat model of chronic heart failure was randomly divided into normal control group and model control group. EGFP-Klotho-BMSC and EGFP-Klotho-BMSC were detected by Doppler ultrasound 28 days after transplantation. The survival and distribution of cells were observed by fluorescence microscope. The pathological changes of myocardial tissue were observed by HE staining. Masson staining was used to detect myocardial collagen deposition and myocardial fibrosis. Results after Klotho transfection into BMSC, the expression of Klotho mRNA increased significantly. After 28 days, echocardiography showed that, Compared with the EGFP-BMSC group and the model control group, the left ventricular ejection fraction (LVEF) of EGFP-Klotho-BMSC group increased P0.05N. EGFP-BMSC group and EGFP-Klotho-BMSC group decreased the degree of myocardial fibrosis compared with the model control group. Conclusion Klotho gene combined with BMSC can improve myocardial fibrosis more obviously than that of EGFP-BMSC group. Treatment can further inhibit myocardial fibrosis, Reduce myocardial interstitial collagen deposition and improve cardiac function.
【作者單位】: 成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院地方干部病房;云南省干細胞工程試驗室;
【基金】:973計劃項目(2012CB518100)
【分類號】:R542.23

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