流體剪切應(yīng)力對人臍靜脈內(nèi)皮細胞Pim-1基因表達的影響
本文關(guān)鍵詞: 內(nèi)皮細胞 Pim- 剪切應(yīng)力 基因表達 出處:《中國臨床解剖學(xué)雜志》2017年06期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的探討流體剪切應(yīng)力對人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)中Pim-1基因表達的影響及可能的信號機制。方法酶消化法分離健康產(chǎn)婦新鮮臍靜脈獲取原代HUVECs,應(yīng)用平行平板流動腔系統(tǒng)給HUVECs加載不同時間(1、4、6 h)和不同大小(0.5、1.5、3.0 Pa)的層流剪切應(yīng)力,用實時定量RT-PCR檢測Pim-1基因的表達水平,用蛋白質(zhì)印跡法檢測p-Akt和p-STAT3的表達水平,利用Wortmannin(PI3K抑制劑)、Deguelin(Akt抑制劑)和AG490(JAK抑制劑)信號阻斷劑探討信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。結(jié)果 HUVECs在1.5 Pa剪切應(yīng)力作用4 h后Pim-1基因表達明顯增加。不同強度的切應(yīng)力均會刺激Pim-1基因的表達,其中3.0 Pa表達最強。切應(yīng)力能顯著激活p-Akt和p-STAT3的表達。AG490可以明顯抑制Pim-1的表達,而Wortmannin和Deguelin增強Pim-1的表達。結(jié)論流體剪切應(yīng)力可誘導(dǎo)HUVECs中Pim-1基因表達,其表達量與刺激時間和剪切應(yīng)力的強度密切相關(guān),這種作用可能通過JAK/STAT3和PI3K/Akt信號通路調(diào)節(jié)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of fluid shear stress on the expression of Pim-1 gene in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) and its signal mechanism. The laminar shear stress of HUVECs is loaded at different times (1 / 4 / 6 h) and 0. 5 / 1. 5 / 3. 0 Pa). The expression levels of Pim-1 gene and p-Akt and p-STAT3 were detected by real-time quantitative RT-PCR and Western blot respectively. The signal transduction pathway was studied by using Wortmannin(PI3K inhibitor Deguelinon Akt inhibitor and AG490(JAK inhibitor). Results the expression of Pim-1 gene increased significantly after HUVECs was exposed to 1.5 Pa shear stress for 4 h. The expression of Pim-1 gene was stimulated by shear stress of different intensities. Shear stress could significantly activate the expression of p-Akt and p-STAT3. AG490 could significantly inhibit the expression of Pim-1, while Wortmannin and Deguelin could enhance the expression of Pim-1. Conclusion fluid shear stress can induce the expression of Pim-1 gene in HUVECs. The expression level is closely related to the stimulation time and shear stress intensity, which may be regulated by JAK/STAT3 and PI3K/Akt signaling pathways.
【作者單位】: 湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬隨州醫(yī)院轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中心;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(31670961) 湖北省科技廳自然基金項目(2015CFB186)
【分類號】:R318.01
【相似文獻】
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,本文編號:1502257
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