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越橘谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶基因的克隆及表達

發(fā)布時間:2018-02-09 20:35

  本文關鍵詞: 越橘 花青素 谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶 基因克隆 基因表達 出處:《吉林農(nóng)業(yè)大學學報》2017年04期  論文類型:期刊論文


【摘要】:以越橘(Vaccinium L.)品種"北陸"為試材,采用反轉(zhuǎn)錄PCR克隆技術(shù)成功克隆越橘谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶基因c DNA全長序列,獲得一個完整的編碼區(qū)c DNA序列,長為690 bp,編碼229個氨基酸,將其命名為VcGSTU1(Gen Bank登錄號KT601064)。經(jīng)與谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶家族其他成員的氨基酸序列比對和系統(tǒng)進化分析,初步確定VcGSTU1屬于谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶Tau家族。生物信息學分析表明,該蛋白不穩(wěn)定指數(shù)為28.80,屬于穩(wěn)定蛋白。預測該蛋白分子量為25.499 ku,等電位點為5.68。蛋白質(zhì)序列同源比對發(fā)現(xiàn)其含有完整的GST-N-Tau和GST-C-Tau結(jié)構(gòu)域。利用反轉(zhuǎn)錄PCR和實時熒光定量PCR(qRT-PCR)2種方法分析谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶的表達模式,該基因在越橘的根、莖、葉芽、葉、花芽、綠果、粉果、藍果、藍果果皮、藍果種子中均有表達,且在藍果種子中相對表達量最高。
[Abstract]:The full-length c DNA sequence of glutathione mercaptotransferase gene (c DNA) was cloned successfully by reverse transcription PCR cloning from "Beilu", a variety of blueberry Vaccinium L., and a complete coding region c DNA was obtained, which was 690 BP long and encoded 229 amino acids. It was named VcGSTU1(Gen Bank accession number KT601064. After amino acid sequence alignment and phylogenetic analysis with other members of glutathione mercaptotransferase family, it was preliminarily confirmed that VcGSTU1 belongs to the glutathione mercaptotransferase Tau family. Bioinformatics analysis showed that VcGSTU1 belonged to glutathione mercaptotransferase Tau family. The instability index of the protein is 28.80, which belongs to the stable protein. The predicted molecular weight of the protein is 25.499ku. the equipotential point is 5.68.The homologous alignment of the protein sequence shows that the protein contains complete GST-N-Tau and GST-C-Tau domains. Reverse transcription PCR and real-time fluorescence are used to determine the protein. The expression pattern of glutathione mercaptotransferase was analyzed by quantitative PCR(qRT-PCR)2 method. The gene was expressed in root, stem, leaf bud, leaf, flower bud, green fruit, powdery fruit, blue fruit, blue fruit peel and blue fruit seed of blueberry, and the highest relative expression was found in blueberry seed.
【作者單位】: 吉林農(nóng)業(yè)大學園藝學院;
【基金】:吉林省科技發(fā)展計劃項目(20150414047GH) 吉林省省級經(jīng)濟結(jié)構(gòu)戰(zhàn)略調(diào)整引導資金專項(2015Y060) 長春市農(nóng)業(yè)先進實用技術(shù)示范推廣計劃項目(14NK010)
【分類號】:S663.9

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8 郭麗U,

本文編號:1498804


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