黃瓜CsHIR1基因表達(dá)載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化
發(fā)布時(shí)間:2018-02-09 08:33
本文關(guān)鍵詞: 黃瓜 CsHIR 表達(dá)載體 遺傳轉(zhuǎn)化 出處:《西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)》2017年02期 論文類型:期刊論文
【摘要】:為了優(yōu)化黃瓜遺傳轉(zhuǎn)化體系以及研究CsHIR1基因在黃瓜中的功能特性,本試驗(yàn)利用In-fusion技術(shù)構(gòu)建植物表達(dá)載體pCAMBIA35S-CsHIR1,經(jīng)過限制性內(nèi)切酶SalⅠ和BamHⅠ雙酶切檢測(cè)、質(zhì)粒PCR檢測(cè)和測(cè)序鑒定,結(jié)果表明,表達(dá)載體pCAMBIA35S-CsHIR1已構(gòu)建成功并轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌GV3101中。以黃瓜抗病種質(zhì)‘PI197088’和感病種質(zhì)‘CCMC’的子葉節(jié)為外植體,通過優(yōu)化的農(nóng)桿菌介導(dǎo)法初步將CsHIR1基因轉(zhuǎn)入黃瓜中,經(jīng)PCR檢測(cè)獲得25株陽(yáng)性植株,其中8株陽(yáng)性植株自交得到種子T1代,T1代PCR檢測(cè)陽(yáng)性率為44.7%,實(shí)時(shí)熒光定量分析表明CsHIR1在T1代陽(yáng)性株中的相對(duì)表達(dá)量稍高于對(duì)照植株,有1株與對(duì)照組的差異較顯著,這為進(jìn)一步研究CsHIR1在黃瓜中的功能奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to optimize the genetic transformation system of cucumber and study the functional characteristics of CsHIR1 gene in cucumber, the plant expression vector pCAMBIA35S-CsHIR1 was constructed by In-fusion technique. The recombinant plasmid was identified by restriction endonuclease Sal 鈪,
本文編號(hào):1497518
本文鏈接:http://sikaile.net/kejilunwen/jiyingongcheng/1497518.html
最近更新
教材專著