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關(guān)嶺牛FoxO6基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建及生物信息學(xué)分析

發(fā)布時(shí)間:2018-02-05 05:50

  本文關(guān)鍵詞: 關(guān)嶺牛 FoxO基因 原核表達(dá)載體 生物信息學(xué)分析 出處:《畜牧與獸醫(yī)》2017年04期  論文類型:期刊論文


【摘要】:應(yīng)用RT-PCR克隆關(guān)嶺牛FoxO6基因的CDS區(qū),構(gòu)建重組表達(dá)載體并對(duì)該基因進(jìn)行相關(guān)生物信息學(xué)分析。獲得關(guān)嶺牛FoxO6基因CDS區(qū),成功構(gòu)建p ET-32a(+)-FoxO6重組表達(dá)載體。FoxO6基因編碼區(qū)為942 bp,編碼313個(gè)氨基酸,表達(dá)蛋白大小為33.60 ku;該蛋白為親水性蛋白,等電點(diǎn)p I=9.44,在體內(nèi)帶正電,二級(jí)結(jié)構(gòu)中主要是無(wú)規(guī)卷曲和α-螺旋;蛋白沒(méi)有信號(hào)肽和明顯的跨膜區(qū),為胞內(nèi)蛋白,主要存在于細(xì)胞核中。重組載體表達(dá)的FoxO6蛋白帶有His等標(biāo)簽,蛋白大小為53.0 ku,共492個(gè)氨基酸。試驗(yàn)對(duì)關(guān)嶺牛FoxO6蛋白的理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)進(jìn)行了初步分析,為研究牛FoxO6蛋白功能及其作用機(jī)制奠定理論基礎(chǔ)。
[Abstract]:The CDS region of the FoxO6 gene of Guanling cattle was cloned by RT-PCR, the recombinant expression vector was constructed and the related bioinformatics analysis was carried out. The CDS region of the FoxO6 gene of Guanling cattle was obtained. The recombinant expression vector of pET-32a. FoxO6 was constructed successfully. The coding region of FoxO6 gene was 942 BP, encoding 313 amino acids. The expressed protein was 33.60 ku. The protein is a hydrophilic protein with a isoelectric point (Pi) of 9.44. It is positively charged in vivo. The secondary structures are mainly random coils and 偽 -helix. The protein, which has no signal peptide and obvious transmembrane region, is an intracellular protein, which is mainly present in the nucleus. The FoxO6 protein expressed by the recombinant vector carries the label such as His, and the protein size is 53.0 ku. The physicochemical properties and structural characteristics of Guanling bovine FoxO6 protein were preliminarily analyzed in order to lay a theoretical foundation for studying the function and mechanism of bovine FoxO6 protein.
【作者單位】: 貴州大學(xué)高原山地動(dòng)物科學(xué)學(xué)院遺產(chǎn)育種與繁殖教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(31571279) 促進(jìn)與美大地區(qū)科研合作與高層次人才培養(yǎng)項(xiàng)目(教外司美[2016]1481號(hào))
【分類號(hào)】:Q78;S823
【正文快照】: 叉頭O家族基因(forkhead box class O family,Fox O)包括Fox O1(FXHR)、Fox O3(FKHRL1)、Fox O4(AFX)和Fox O6[1],該家族各基因蛋白參與細(xì)胞的各種生理過(guò)程,如:糖代謝、應(yīng)激、細(xì)胞分化、細(xì)胞周期調(diào)節(jié)和細(xì)胞凋亡[2-3]。該家族基因可以直接結(jié)合到目的基因的反式作用元件(保守序

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本文編號(hào):1492308

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