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關嶺牛FoxO6基因原核表達載體的構(gòu)建及生物信息學分析

發(fā)布時間:2018-02-05 05:50

  本文關鍵詞: 關嶺牛 FoxO基因 原核表達載體 生物信息學分析 出處:《畜牧與獸醫(yī)》2017年04期  論文類型:期刊論文


【摘要】:應用RT-PCR克隆關嶺牛FoxO6基因的CDS區(qū),構(gòu)建重組表達載體并對該基因進行相關生物信息學分析。獲得關嶺牛FoxO6基因CDS區(qū),成功構(gòu)建p ET-32a(+)-FoxO6重組表達載體。FoxO6基因編碼區(qū)為942 bp,編碼313個氨基酸,表達蛋白大小為33.60 ku;該蛋白為親水性蛋白,等電點p I=9.44,在體內(nèi)帶正電,二級結(jié)構(gòu)中主要是無規(guī)卷曲和α-螺旋;蛋白沒有信號肽和明顯的跨膜區(qū),為胞內(nèi)蛋白,主要存在于細胞核中。重組載體表達的FoxO6蛋白帶有His等標簽,蛋白大小為53.0 ku,共492個氨基酸。試驗對關嶺牛FoxO6蛋白的理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)特點進行了初步分析,為研究牛FoxO6蛋白功能及其作用機制奠定理論基礎。
[Abstract]:The CDS region of the FoxO6 gene of Guanling cattle was cloned by RT-PCR, the recombinant expression vector was constructed and the related bioinformatics analysis was carried out. The CDS region of the FoxO6 gene of Guanling cattle was obtained. The recombinant expression vector of pET-32a. FoxO6 was constructed successfully. The coding region of FoxO6 gene was 942 BP, encoding 313 amino acids. The expressed protein was 33.60 ku. The protein is a hydrophilic protein with a isoelectric point (Pi) of 9.44. It is positively charged in vivo. The secondary structures are mainly random coils and 偽 -helix. The protein, which has no signal peptide and obvious transmembrane region, is an intracellular protein, which is mainly present in the nucleus. The FoxO6 protein expressed by the recombinant vector carries the label such as His, and the protein size is 53.0 ku. The physicochemical properties and structural characteristics of Guanling bovine FoxO6 protein were preliminarily analyzed in order to lay a theoretical foundation for studying the function and mechanism of bovine FoxO6 protein.
【作者單位】: 貴州大學高原山地動物科學學院遺產(chǎn)育種與繁殖教育部重點實驗室;
【基金】:國家自然科學基金(31571279) 促進與美大地區(qū)科研合作與高層次人才培養(yǎng)項目(教外司美[2016]1481號)
【分類號】:Q78;S823
【正文快照】: 叉頭O家族基因(forkhead box class O family,Fox O)包括Fox O1(FXHR)、Fox O3(FKHRL1)、Fox O4(AFX)和Fox O6[1],該家族各基因蛋白參與細胞的各種生理過程,如:糖代謝、應激、細胞分化、細胞周期調(diào)節(jié)和細胞凋亡[2-3]。該家族基因可以直接結(jié)合到目的基因的反式作用元件(保守序

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