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雞源ADAR2基因克隆及其抗新城疫病毒作用研究

發(fā)布時(shí)間:2018-02-04 09:00

  本文關(guān)鍵詞: 雞雙鏈RNA特異性腺苷脫氨酶基因 新城疫病毒 RNA編輯 抗病毒作用 出處:《中國(guó)動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào)》2017年02期  論文類(lèi)型:期刊論文


【摘要】:目前對(duì)家禽中雙鏈RNA特異性腺苷脫氨酶(adenosine deaminase acting on double-stranded RNA,ADAR)的種類(lèi)、組織分布及其功能尚不明了。本研究中以刀豆素、poly I:C以及新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)作為刺激物誘導(dǎo)雞胚成纖維細(xì)胞(chicken embryo fibroblast,CEF)中ADARs基因上調(diào),擴(kuò)增獲得雞ADAR2基因的mRNA。為了鑒定ADAR2的抗病毒作用,本研究構(gòu)建了能夠偶聯(lián)有綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的ADAR2重組真核表達(dá)質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染DF1細(xì)胞,結(jié)果顯示在過(guò)量表達(dá)ADAR2的細(xì)胞中,NDV的增殖受到了顯著抑制,表明ADAR2在NDV感染過(guò)程中發(fā)揮重要的抗病毒作用,這為進(jìn)一步研究雞RNA編輯酶對(duì)NDV RNA編輯奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:At present, adenosine deaminase acting on double-stranded RNA, a double-stranded RNA specific adenosine deaminase, was used in poultry. The species, tissue distribution and function of ADAR are unknown. Concanavalin is used in this study. Poly I: C and Newcastle disease virus. NDV was used as a stimulant to induce the up-regulation of ADARs gene in chicken embryo fibroblast cells. The mRNAs of chicken ADAR2 gene were amplified. In order to identify the antiviral effect of ADAR2. In this study, the recombinant eukaryotic expression plasmid of ADAR2 was constructed, which could couple the green fluorescent protein with green fluorescent protein (GFP). The results of transfection of DF1 cells showed that the proliferation of ADAR2 was significantly inhibited in the cells over-expressing ADAR2, indicating that ADAR2 played an important antiviral role in the process of NDV infection. This laid a foundation for further study on the editing of NDV RNA by chicken RNA editing enzyme.
【作者單位】: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所;
【基金】:公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專(zhuān)項(xiàng)經(jīng)費(fèi)(201303033) 國(guó)家自然科學(xué)基金(31101822,31530074)
【分類(lèi)號(hào)】:S852.65
【正文快照】: 雙鏈R N A特異性腺昔脫氨酶(a d e n o s i n edeaminase acting on double-stranded RNA,ADAR)基因家族廣泛存在于從線蟲(chóng)到人的各種生物細(xì)胞中,因其所編碼的RNA編輯酶可作用于特定雙鏈RNA結(jié)構(gòu)和m RNA前體,引起腺苷發(fā)生脫氨基變成肌苷(A→I)而得名,這一現(xiàn)象被命名為“RNA編輯

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本文編號(hào):1489869

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