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一個(gè)參與擬南芥DNA去甲基化過(guò)程候選基因的定位與功能分析

發(fā)布時(shí)間:2018-02-02 12:08

  本文關(guān)鍵詞: 擬南芥 rll 圖位克隆 DNA去甲基化 出處:《植物生理學(xué)報(bào)》2017年04期  論文類(lèi)型:期刊論文


【摘要】:以轉(zhuǎn)基因擬南芥(Arabidopsis thaliana)Col-LUC為親本材料,把它的種子進(jìn)行甲基磺酸乙酯(EMS)誘變,在M2代幼苗中篩選出一株熒光降低的候選突變體,命名為rll1(reduced LUC luminescence 1),此突變基因?qū)?yīng)的野生型基因位點(diǎn)因此被命名為At RLL1位點(diǎn)。該突變體在生長(zhǎng)發(fā)育方面表現(xiàn)出明顯矮化、角果較短、葉片較小的發(fā)育缺陷表型。遺傳學(xué)分析表明該突變屬于細(xì)胞核單基因隱性突變。通過(guò)圖位克隆技術(shù)把At RLL1位點(diǎn)定位于2號(hào)染色體T3K9克隆。酶切PCR(chop-PCR)結(jié)果表明該突變體中35S啟動(dòng)子和基因組DNA上的多個(gè)位點(diǎn)均表現(xiàn)出甲基化升高的現(xiàn)象。反轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)結(jié)果表明rll1中一些RNA介導(dǎo)的DNA甲基化(Rd DM)途徑的內(nèi)源靶基因的表達(dá)量明顯下降。綜上所述,這些研究結(jié)果表明At RLL1位點(diǎn)很可能參與了擬南芥DNA去甲基化過(guò)程。
[Abstract]:The seeds of Arabidopsis thaliana)Col-LUC were mutated by ethyl methyl sulfonate (EMSs). A candidate mutant, named rll1(reduced LUC luminescence 1, was selected from M2 seedlings. The wild-type gene site corresponding to the mutant gene was named at RLL1 locus. The mutant showed obvious dwarfism in growth and development and short pods. Small developmental defect phenotype in leaves. Genetic analysis showed that the mutation was a recessive mutation of nuclear single gene. The RLL1 locus was located on chromosome T3K9 of chromosome 2. The results of chop-PCR showed that the promoter of 35s and multiple loci of genomic DNA in the mutant showed the phenomenon of increased methylation. Reverse transcriptional PCR- RT-PCR). The results showed that the expression of endogenous target genes in some RNA mediated DNA methylation (Rd) pathway in rll1 was significantly decreased. These results suggest that the at RLL1 site may be involved in the DNA demethylation process in Arabidopsis thaliana.
【作者單位】: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)中央高;究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)(KYRC201409)~~
【分類(lèi)號(hào)】:Q943.2
【正文快照】: 收稿2017-02-20修定2017-03-22資助南京農(nóng)業(yè)大學(xué)中央高;究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)(KYRC201409)。在高等真核生物中,表觀遺傳修飾調(diào)控基因表達(dá),在個(gè)體發(fā)育、病毒抗性、轉(zhuǎn)座子沉默和轉(zhuǎn)基因表達(dá)等方面均發(fā)揮著重要的作用(Amedeo等2000)。在高等植物中,基因沉默的類(lèi)型可以分為轉(zhuǎn)錄水平基因

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本文編號(hào):1484474

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