本文關(guān)鍵詞： PLCD1 胰腺癌 周期 凋亡 遷移和侵襲　出處：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:探討pcDNA3.1-PLCD1質(zhì)粒轉(zhuǎn)染胰腺癌細(xì)胞CAPAN-1和BXPC-3后,對CAPAN-1和BXPC-3的PLCD1 mRNA和PLCD1蛋白表達(dá)的影響以及對CAPAN-1和BXPC-3細(xì)胞的增殖、周期、凋亡、遷移、侵襲的影響。方法:首先培養(yǎng)人正常胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞株HPDE6C7和胰腺癌細(xì)胞株CAPAN-1、PANC-1、ASPC-1及BXPC-3,并提取五組細(xì)胞的RNA后逆轉(zhuǎn)錄,再進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)篩選出低表達(dá)PLCD1的胰腺癌細(xì)胞株;再將挑選出的胰腺癌細(xì)胞株CAPAN-1和BXPC-3進(jìn)行轉(zhuǎn)染,實驗分為pcDNA3.1-PLCD1轉(zhuǎn)染組和pcDNA3.1轉(zhuǎn)染組;再進(jìn)行RT-PCR檢測轉(zhuǎn)染后CAPAN-1和BXPC-3細(xì)胞PLCD1 mRNA的表達(dá)情況,進(jìn)行Western blot檢測其PLCD1蛋白的表達(dá)情況,CCK-8和集落形成檢測轉(zhuǎn)染后細(xì)胞CAPAN-1和BXPC-3增殖情況,流式測定和分析其周期和凋亡情況,Transwell檢測轉(zhuǎn)染后CAPAN-1和BXPC-3的遷移及侵襲能力。結(jié)果:成功篩選出低表達(dá)PLCD1的CAPAN-1和BXPC-3細(xì)胞用于進(jìn)行后續(xù)實驗,CAPAN-1和BXPC-3細(xì)胞的pcDNA3.1-PLCD1轉(zhuǎn)染組高表達(dá)PLCD1 mRNA和PLCD1蛋白;同時CAPAN-1和BXPC-3細(xì)胞的pcDNA3.1-PLCD1轉(zhuǎn)染組可抑制細(xì)胞增殖、遷移及侵襲;另外pcDNA3.1-PLCD1轉(zhuǎn)染組可促進(jìn)CAPAN-1和BXPC-3細(xì)胞周期阻滯于G1期,并可促進(jìn)細(xì)胞凋亡。結(jié)論:PLCD1基因可促進(jìn)胰腺癌CAPAN-1和BXPC-3細(xì)胞凋亡并使細(xì)胞停在G1期,并可抑制細(xì)胞增殖、遷移及侵襲能力。
[Abstract]:Objective: to investigate the transfection of pcDNA3.1-PLCD1 plasmid into pancreatic cancer cells CAPAN-1 and BXPC-3. The effects on the expression of PLCD1 mRNA and PLCD1 in CAPAN-1 and BXPC-3 and on the proliferation, cycle and apoptosis of CAPAN-1 and BXPC-3 cells. Methods: human pancreatic ductal epithelial cell line HPDE6C7 and pancreatic cancer cell line CAPAN-1pPANC-1 were first cultured. ASPC-1 and BXPC-3 were used to extract RNA from five groups of cells, and then PCR amplification was performed to screen the pancreatic cancer cell lines with low expression of PLCD1. Then the selected pancreatic cancer cell lines CAPAN-1 and BXPC-3 were transfected and divided into pcDNA3.1-PLCD1 transfection group and pcDNA3.1 transfection group. RT-PCR was used to detect the expression of PLCD1 mRNA in CAPAN-1 and BXPC-3 cells after transfection. The expression of PLCD1 protein was detected by Western blot and the proliferation of CAPAN-1 and BXPC-3 after transfection was detected by CCK-8 and colony formation. The cell cycle and apoptosis were analyzed by flow cytometry. Transwell was used to detect the migration and invasion ability of CAPAN-1 and BXPC-3 after transfection. Results:. CAPAN-1 and BXPC-3 cells with low expression of PLCD1 were successfully screened for subsequent experiments. PLCD1 mRNA and PLCD1 protein were highly expressed in pcDNA3.1-PLCD1 transfection group of CAPAN-1 and BXPC-3 cells. At the same time, pcDNA3.1-PLCD1 transfection of CAPAN-1 and BXPC-3 cells inhibited cell proliferation, migration and invasion. In addition, pcDNA3.1-PLCD1 transfection group could promote CAPAN-1 and BXPC-3 cell cycle arrest in G1 phase. Conclusion WPLCD1 gene can promote the apoptosis of CAPAN-1 and BXPC-3 cells in pancreatic cancer and stop the cells in G1 phase, and inhibit the ability of cell proliferation, migration and invasion.
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.9

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