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水稻粉質(zhì)胚乳突變體ws的表型分析及基因克隆

發(fā)布時間:2018-01-31 12:53

  本文關(guān)鍵詞: 胚乳粉質(zhì)突變體 AGPase 淀粉 基因表達(dá) 理化性質(zhì) 水稻 出處:《中國水稻科學(xué)》2016年05期  論文類型:期刊論文


【摘要】:從甲基亞硝基脲(1-Methyl-1-Nitrosourea,MNU)處理的粳稻品種滇粳優(yōu)1號突變體庫中,篩選到一個穩(wěn)定遺傳的胚乳粉質(zhì)突變體ws,其籽粒的千粒重、籽粒大小、總淀粉含量、直鏈淀粉含量等指標(biāo)均降低,淀粉在尿素溶液中的膨脹能力減弱。對成熟及發(fā)育中的胚乳淀粉結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察,發(fā)現(xiàn)ws突變體的胚乳中產(chǎn)生大量小而不規(guī)則排布的單淀粉顆粒。利用F2群體中分離出的92個隱性極端個體將突變基因連鎖在第8染色體近著絲粒位置,隨后共用2025個極端個體將目標(biāo)基因定位于95kb的區(qū)間。測序發(fā)現(xiàn)ws突變體中編碼腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(Adenosine diphosphate glucose pyrophosphorylase,AGPase)小亞基S2的基因發(fā)生點(diǎn)突變,導(dǎo)致編碼氨基酸的替換;虮磉_(dá)分析發(fā)現(xiàn),突變體胚乳中編碼AGPase各亞基的相關(guān)基因表達(dá)量沒有發(fā)生顯著改變,而Western雜交分析顯示突變體中AGPS2b的蛋白含量下降。同時,ws突變體的胚乳中AGPase活性下降為野生型的一半。研究結(jié)果表明,OsAGPS2的突變導(dǎo)致水稻胚乳中AGPase活性降低,從而影響了淀粉合成。
[Abstract]:A japonica rice variety Dianjingyou 1 was treated with 1-Methyl-1-Nitrosourea- MNU). A stable endosperm powdery mutant wswas screened. Its grain weight, grain size, total starch content and amylose content were all decreased. The swelling ability of starch in urea solution was weakened. The structure of endosperm starch in maturation and development was observed. It was found that a large number of small and irregular single starch granules were produced in the endosperm of ws mutants. Using 92 recessive extreme individuals isolated from F2 population, the mutant gene was linked to the near centromere position on chromosome 8. The target gene was then located at 95kb in 2025 extreme individuals. Sequencing revealed that the ws mutant encodes an adenosine diphosphate glucose pyrophosphorylase (ADP). Adenosine diphosphate glucose pyrophosphorylase. The gene of small subunit S2 of AGPase had a point mutation, which led to the substitution of encoded amino acids. The expression of the related genes encoding AGPase subunits in the endosperm of the mutant did not change significantly, while Western blot analysis showed that the protein content of AGPS2b in the mutant decreased. The activity of AGPase in the endosperm of ws mutant decreased by half of that of the wild type. The results showed that the mutation of OsAGPS2 resulted in the decrease of AGPase activity in the endosperm of rice. Thus, starch synthesis was affected.
【作者單位】: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)作物遺傳與種質(zhì)創(chuàng)新國家重點(diǎn)實驗室/農(nóng)業(yè)部長江中下游粳稻生物學(xué)與遺傳育種重點(diǎn)實驗室/長江流域雜交水稻協(xié)同創(chuàng)新中心/江蘇省現(xiàn)代作物生產(chǎn)中心;
【基金】:國家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(2014ZX08001006) 國家自然科學(xué)基金資助項目(31371598) 江蘇省科技支撐計劃資助項目(BE2014394) 農(nóng)業(yè)部長江中下游粳稻生物學(xué)與遺傳育種重點(diǎn)實驗室、長江流域雜交水稻協(xié)同創(chuàng)新中心、江蘇省現(xiàn)代作物生產(chǎn)中心資助項目
【分類號】:Q943.2;S511
【正文快照】: 水稻是世界上最重要的糧食作物之一,世界上子的主要貯藏物質(zhì),其結(jié)構(gòu)和性質(zhì)決定了稻米的外有1/3以上的人口以稻米為主食。淀粉作為水稻種觀品質(zhì)和食味品質(zhì)。因此,對淀粉合成相關(guān)基因的 克隆和鑒定,不僅在科學(xué)上對闡明水稻淀粉合成及研究顯示,AGPase的催化功能由大小亞基相互協(xié)

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本文編號:1479109

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