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干擾CHD1L基因?qū)Ω蝺?nèi)膽管細(xì)胞癌細(xì)胞系增殖和侵襲的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-01-31 12:17

  本文關(guān)鍵詞: CHDL RNAi 肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌 增殖 遷移 侵襲 出處:《腫瘤防治研究》2017年08期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的探討沉默CHD1L基因?qū)Ω蝺?nèi)膽管細(xì)胞癌(ICC)細(xì)胞系增殖和侵襲的影響。方法采用Western blot和q RT-PCR法檢測(cè)三種ICC細(xì)胞系(RBE、HCCC-9810、HUCCT1)中CHD1L蛋白和mRNA的表達(dá);選擇CHD1L高表達(dá)的ICC細(xì)胞系,將CHD1L-RNAi轉(zhuǎn)染該細(xì)胞后,用Western blot法篩選出干擾效果最好的CHD1L-RNAi;應(yīng)用CCK-8法、平板克隆集落形成實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)染CHD1L-RNAi后細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力的變化。結(jié)果 CHD1L蛋白和mRNA水平在RBE細(xì)胞系中明顯高于HCCC-9810和HUCCT1細(xì)胞系(P=0.003,P=0.012和P=0.008,P=0.015);CHD1L-RNAi1的干擾效果明顯優(yōu)于CHD1L-RNAi2和CHD1L-RNAi3(P=0.003,P=0.008);干擾CHD1L的表達(dá),結(jié)果顯示CHD1L-RNAi1組的增殖率、集落形成數(shù)、遷移率和穿膜的細(xì)胞數(shù)明顯低于未處理組和陰性對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論干擾CHD1L基因能有效抑制RBE細(xì)胞系的增殖、遷移及侵襲能力。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of silencing CHD1L gene on intrahepatic cholangiocarcinoma. Methods Western blot and Q RT-PCR were used to detect the proliferation and invasion of three ICC cell lines. The expression of CHD1L protein and mRNA in HCCC-9810 HUCCT1; The ICC cell line with high expression of CHD1L was selected and CHD1L-RNAi was transfected into the cell line. Western blot method was used to screen out the best interference effect of CHD1L-RNAi. CCK-8 assay, plate clone colony formation assay, cell scratch assay and Transwell migration and invasion assay were used to detect the cell proliferation after transfection of CHD1L-RNAi. Results the levels of CHD1L protein and mRNA in RBE cell line were significantly higher than those in HCCC-9810 and HUCCT1 cell line P0. 003. P0. 012 and P0. 008, P0. 015; The interference effect of CHD1L-RNAi1 was significantly better than that of CHD1L-RNAi2 and CHD1L-RNAi3P0. 003P0. 008. Interfering with the expression of CHD1L, the results showed that the proliferation rate, colony formation number, migration rate and the number of cells transmembrane in CHD1L-RNAi1 group were significantly lower than those in untreated group and negative control group. Conclusion interfering CHD1L gene can effectively inhibit the proliferation, migration and invasion of RBE cell line.
【作者單位】: 南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院肝膽外科;南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院江西省分子醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:江西省自然科學(xué)基金(20151BAB205010) 江西省衛(wèi)計(jì)委科技廳項(xiàng)目(20161048) 南昌大學(xué)研究生創(chuàng)新基金項(xiàng)目(cx2015203)
【分類號(hào)】:R735.8
【正文快照】: 0引言染色質(zhì)解旋酶DNA結(jié)合蛋白樣-1樣基因(chro-modomain helicase/ATPase DNA binding protein1-like gene,CHD1L)是在肝癌中新發(fā)現(xiàn)的致癌基因,它屬于Sucrose nonfermenting2(SNF-2)類家族成員,具有高度保守的解旋酶功能,在維持染色質(zhì)穩(wěn)定、轉(zhuǎn)錄調(diào)控和DNA修復(fù)中起重要作用[1-

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本文編號(hào):1479044

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