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捻轉(zhuǎn)血矛線蟲NADH:泛醌氧化還原酶結(jié)構(gòu)域包含蛋白基因的克隆表達(dá)及功能分析

發(fā)布時(shí)間:2018-01-31 04:56

  本文關(guān)鍵詞: 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲 山羊 NADH 泛醌氧化還原酶結(jié)構(gòu)域包含蛋白 外周血單個(gè)核細(xì)胞 出處:《畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年04期  論文類型:期刊論文


【摘要】:選取捻轉(zhuǎn)血矛線蟲NADH:泛醌氧化還原酶結(jié)構(gòu)域包含蛋白(NDUDC)基因進(jìn)行克隆表達(dá),并對(duì)其功能進(jìn)行研究。采用RT-PCR方法對(duì)NDUDC基因進(jìn)行克隆,構(gòu)建表達(dá)載體得到重組蛋白質(zhì),Western blot分析蛋白質(zhì)的抗原特性;采血分離山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)與重組蛋白質(zhì)共培養(yǎng),利用間接免疫熒光試驗(yàn)檢驗(yàn)重組蛋白質(zhì)與細(xì)胞的結(jié)合情況;以不同質(zhì)量濃度(0、10、20、40μg·mL-1)重組蛋白質(zhì)刺激細(xì)胞,測(cè)定其對(duì)細(xì)胞增殖、細(xì)胞遷移和NO分泌的影響。結(jié)果表明,重組蛋白質(zhì)能夠有效刺激細(xì)胞增殖,顯著提高細(xì)胞遷移能力以及增加NO的分泌?梢(jiàn)NDUDC蛋白具有較強(qiáng)的抗原性,可刺激細(xì)胞發(fā)揮免疫功能。
[Abstract]:Selection of Haemonchus NADH: quinone oxidoreductase domain containing protein (NDUDC) gene cloning and expression, and to study its function. RT-PCR method was used to clone the NDUDC gene expression vector was constructed by recombinant Western protein, blot protein antigen characteristics analysis; separation of goat peripheral blood mononuclear cells (blood PBMCs) co cultured with recombinant protein, using the combination of indirect immunofluorescence test of recombinant proteins and cells; with different concentrations (0,10,20,40 g mL-1) recombinant protein stimulated cells, determine its effects on cell proliferation, cell migration and secretion of NO. The results showed that the recombinant protein can effectively stimulate cell proliferation, significantly to improve the ability of cell migration and increase the secretion of NO. The visible NDUDC protein has strong antigenicity, can stimulate the cell immune function.

【作者單位】: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院;
【基金】:國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)發(fā)展研究計(jì)劃(973計(jì)劃)(2015CB150300) 江蘇高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科資助項(xiàng)目(PAPD)
【分類號(hào)】:S852.731
【正文快照】: 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(Haemonchus contortus)隸屬毛圓科(Trichostrongylidae)血矛屬(Haemonchus),是牛、羊等反芻動(dòng)物一種常見(jiàn)的胃腸道寄生性線蟲,主要寄生于皺胃,偶見(jiàn)于小腸,以吸食宿主血液為生[1],可引起宿主皺胃黏膜的出血、損傷、發(fā)炎,影響宿主物質(zhì)代謝,進(jìn)而導(dǎo)致患畜貧血、腹瀉、

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1478259


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