本文關鍵詞： 骨髓 間充質(zhì)干細胞 磁共振成像 靶向基因載體 納米醫(yī)學　出處：《中國醫(yī)學影像技術(shù)》2017年10期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的探討靶向納米基因載體單鏈神經(jīng)節(jié)苷脂抗體-聚乙二醇-聚乙烯亞胺-超順磁性氧化鐵(scAbGD2-PEGg-PEI-SPION)轉(zhuǎn)染人骨髓間充質(zhì)干細胞(hBMSCs)的可行性、效率及體外細胞MR顯像能力。方法合成scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION后,采用凝膠阻滯實驗評估其復合外源性基因的能力;動態(tài)光散射法測量scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION/pDNA納米復合物的粒徑大小及表面電位;體外細胞毒性實驗檢測其對hBMSCs的細胞毒性。采用流式細胞儀檢測scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION靶向轉(zhuǎn)染hBMSCs的效率,并設置PEG-g-PEI-SPION組、cAbGD2-PEG-g-PEI-SPION組、抗體競爭抑制(scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION+free AbGD2)組和同型抗體(scAbIgG2a-PEG-g-PEI-SPION)組,通過激光共聚焦顯微鏡及普魯士藍染色觀察hBMSCs對納米復合物的攝入。通過體外細胞MR掃描驗證scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION的MR成像功能。結(jié)果 scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION細胞毒性小,復合外源性基因后能夠形成穩(wěn)定的納米復合物,粒徑80~100nm。在相同的N/P比值下,scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION組的轉(zhuǎn)染率明顯高于其他組(P0.001)。N/P=20時,靶向組具有最高轉(zhuǎn)染率[(59.60±4.50)%]。同時,scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION中的SPION可有效標記hBMSCs,在MR T2/T2*加權(quán)圖像上呈低信號。結(jié)論 scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION是一種MRI可視的、可有效轉(zhuǎn)染hBMSCs的靶向納米基因載體。
[Abstract]:Objective to investigate the single chain ganglioside antibody (PEG-PEGg-PEI-SPION) targeting nanometer-sized gene vector, Poly (ethylene glycol) polyethyleneimide-superparamagnetic ferric oxide (scAbGD2-PEGg-PEI-SPION). The feasibility of transfection of human bone marrow mesenchymal stem cells (hBMSCs). Methods after scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION was synthesized, the ability of compound exogenous gene was evaluated by gel block assay. The particle size and surface potential of scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION/pDNA nanocomposites were measured by dynamic light scattering method. In vitro cytotoxicity test was used to detect its cytotoxicity to hBMSCs. Flow cytometry was used to detect the efficiency of scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION targeted transfection of hBMSCs. CAbGD2-PEG-g-PEI-SPION group was set up in PEG-g-PEI-SPION group. Antibody competitive inhibition (scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION free AbGD2) and the same type of antibody (GD2-PEG-PEI-SPION free AbGD2). ScAbIgG2a-PEG-g-PEI-SPION) group. The uptake of nanocomposites by hBMSCs was observed by laser confocal microscopy and Prussian blue staining. ScAbGD2-PEG-g-PEI-SPION was verified by in vitro cell Mr scanning. Mr imaging function of the. The cytotoxicity of scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION was small. The composite of exogenous genes could form a stable nano-complex with a particle size of 80 ~ 100nm. under the same N / P ratio. The transfection efficiency of scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION group was significantly higher than that of other groups (P 0.001N / P = 20:00), and the target group had the highest transfection efficiency. [At the same time, SPION in scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION could effectively label hBMSCs. Conclusion scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION is visualized by MRI. It can effectively transfect hBMSCs targeting nanogene vector.
【作者單位】： 中山大學附屬第五醫(yī)院介入醫(yī)學中心;中山大學附屬第五醫(yī)院眼科;
【基金】：國家自然科學基金青年基金(81501561) 廣東省自然科學基金(2014A030310043、2017A030313873)
【分類號】：R445.2
【正文快照】： 人骨髓間充質(zhì)干細胞(human　bone　marrow-de-rived　mesenchymal　stem　cells,hBMSCs)具有向肝樣細胞分化的潛能,參與肝損傷的修復[1-2]。隨著對治療機制研究的深入,發(fā)現(xiàn)移植入肝臟的hBMSCs僅少數(shù)分化為肝樣細胞,多數(shù)hBMSCs以旁分泌和免疫調(diào)節(jié)的方式參與肝損傷的修復,極大降

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本文編號：1460471