本文關(guān)鍵詞： MO SRPS 克隆 原核表達(dá) 免疫原性 反應(yīng)原性　出處：《家畜生態(tài)學(xué)報》2017年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：本研究以綿羊肺炎支原體(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)新疆流行株基因組DNA為模板,通過PCR擴(kuò)增30S RPS11基因,對其進(jìn)行分子特征性分析,并將其抗原表位集中區(qū)進(jìn)行原核表達(dá),分析重組蛋白免疫原性。結(jié)果表明,30S RPS11基因全長405bp,編碼134個氨基酸,該蛋白是一種受磷酸化調(diào)控的蛋白,含有一個核糖體蛋白S11信號。SDSPAGE結(jié)果顯示,篩選的抗原表位集中區(qū)重組蛋白分子質(zhì)量為29kDa;Western blot分析顯示,該重組蛋白可被MO陽性血清特異性識別,說明其具有良好的反應(yīng)原性;小鼠免疫試驗(yàn)表明,重組蛋白誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生的間接血凝抗體效價可達(dá)1∶32~1∶64,表明其具有較強(qiáng)的免疫原性。本試驗(yàn)首次證實(shí)MO核糖體蛋白(30SRPS11)具有良好的免疫原性和反應(yīng)原性,為MO血清學(xué)診斷及亞單位疫苗研發(fā)提供了科學(xué)依據(jù)。
[Abstract]:In this study, Mycoplasma pneumoniae (Mycoplasma ovipneumoniae MO) Xinjiang strains 30S genomic DNA as template, RPS11 gene was amplified by PCR and analyzed the molecular characteristics of it, and the epitope concentration area for prokaryotic expression analysis of recombinant protein immunogenicity. The results showed that the full-length 405bp gene of 30S RPS11. Encoding 134 amino acids. The protein is a protein by phosphorylation regulation, containing a ribosomal protein S11 signal.SDSPAGE showed that screening epitope recombinant protein molecular mass concentration area is 29kDa; Western blot analysis showed that the recombinant protein was MO positive serum shows its immunogenicity good response; mice immunological tests showed that the recombinant protein induced indirect hemagglutination antibody titer of 1: 32~1: 64, show that it has strong immunogenicity. This experiment confirmed that the first MO Ribosomal protein (30SRPS11) has good immunogenicity and reactivity, which provides a scientific basis for MO serological diagnosis and subunit vaccine development.

【作者單位】： 石河子大學(xué)動物科技學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所;
【基金】：國家國際科技合作專項(2014DFR31310) 國家自然科學(xué)基金(31360596)
【分類號】：S852.62
【正文快照】： 綿羊肺炎支原體(Mycoplasma ovipneumoni-ae,MO)是綿羊、山羊呼吸道感染的重要致病菌之一,病羊是主要的傳染源,傳播方式主要為接觸感染,如吸入病羊的呼吸道飛沫而發(fā)病。MO可粘附在綿羊呼吸道粘膜表面引起感染,發(fā)病羊主要表現(xiàn)為干咳、消瘦和發(fā)育不良。該病在全球范圍內(nèi)廣泛分布

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本文編號：1458254