煙草氧化脅迫相關(guān)基因NtOSA1的克隆表達(dá)及亞細(xì)胞定位分析
本文關(guān)鍵詞: 煙草 氧化脅迫相關(guān)Abc基因 基因克隆 表達(dá)特性 亞細(xì)胞定位 出處:《西北植物學(xué)報(bào)》2016年08期 論文類型:期刊論文
【摘要】:植物類蛋白激酶Abc1家族(activity of bc1complex)在植物生長(zhǎng)發(fā)育及響應(yīng)非生物脅迫中起著重要的作用。該研究通過(guò)將擬南芥AtOSA1蛋白氨基酸序列與煙草轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì),利用巢式PCR技術(shù)克隆得到1個(gè)煙草氧化脅迫相關(guān)Abc1家族基因NtOSA1,NtOSA1與擬南芥AtOSA1基因具有72.89%的一致性。NtOSA1基因開放閱讀框長(zhǎng)度為2 283bp,編碼760個(gè)氨基酸,含有典型的ABC1結(jié)構(gòu)域、一個(gè)激酶結(jié)構(gòu)域、葉綠體定位信號(hào)肽和兩個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),對(duì)NtOSA1基因在煙草不同組織以及氧化脅迫、鹽脅迫等處理下的表達(dá)分析表明:NtOSA1基因的表達(dá)具有組織特異性,主要在葉片中表達(dá);NtOSA1基因在H2O2和NaCl處理后表達(dá)量上升,均在處理后6h達(dá)到最大值,分別為處理前的1.95和2.69倍。亞細(xì)胞定位結(jié)果表明,NtOSA1蛋白定位在細(xì)胞葉綠體上,與預(yù)測(cè)結(jié)果一致。研究表明,NtOSA1基因參與了煙草抗氧化脅迫和鹽脅迫的響應(yīng)。
[Abstract]:Plant protein kinase Abc1 family activity of bc1 complex. It plays an important role in plant growth and response to abiotic stress. In this study, the amino acid sequences of Arabidopsis AtOSA1 protein were compared with tobacco transcriptional data. A Abc1 gene NtOSA1 of tobacco oxidative stress was cloned by nested PCR technique. The length of NtOSA1 and Arabidopsis AtOSA1 gene was 72.89%. The length of open reading frame of NtOSA1 gene was 2283bpand encoding 760 amino acids. It contains a typical ABC1 domain, a kinase domain, chloroplast localization signal peptide and two transmembrane domains. Real-time quantitative PCR technique is used. The analysis of the expression of NtOSA1 gene in different tissues, oxidative stress, salt stress and other treatments showed that the expression of the NtOSA1 gene was tissue-specific, mainly in the leaves. The expression of NtOSA1 gene increased after treatment with H2O2 and NaCl, and reached the maximum at 6 h after treatment, which was 1.95 and 2.69 times higher than that before treatment, respectively. The NtOSA1 protein was located in the chloroplast of the cells, which was consistent with the predicted results. It was found that the NtOSA1 gene was involved in the responses of tobacco to antioxidant and salt stress.
【作者單位】: 西南科技大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院;西南科技大學(xué)核廢物與環(huán)境安全國(guó)防重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(31500205) 西南科技大學(xué)博士研究基金(14zx7153);西南科技大學(xué)校長(zhǎng)機(jī)動(dòng)費(fèi)特殊資助(14zx1104) 四川省生物質(zhì)資源利用與改性工程中心項(xiàng)目(13zxsk02)
【分類號(hào)】:Q943.2
【正文快照】: 植物在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中不可避免會(huì)遭遇到各種逆境脅迫,如高溫、低溫、干旱、重金屬和鹽堿等。這些逆境脅迫會(huì)使植物氧化還原代謝失衡,導(dǎo)致體內(nèi)積累大量的活性氧,從而產(chǎn)生氧化脅迫。過(guò)量的活性氧能與脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、DNA以及其他生物大分子發(fā)生反應(yīng),從而造成機(jī)體損傷甚至死亡[1]。
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2 陳笑s,
本文編號(hào):1450390
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