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冠突散囊菌nsdD基因超表達(dá)菌株的構(gòu)建及表型分析

發(fā)布時間:2018-01-20 03:40

  本文關(guān)鍵詞: 冠突散囊菌 表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建 nsd D基因超表達(dá) 農(nóng)桿菌介導(dǎo) 出處:《基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)》2017年03期  論文類型:期刊論文


【摘要】:為了研究冠突散囊菌nsdD基因的功能,本研究將冠突散囊菌nsdD的cDNA置于強(qiáng)啟動子三磷酸甘油醛脫氫酶啟動子PgpdA下游及色氨酸合成酶C基因終止子TtrpC上游構(gòu)建nsdD基因超表達(dá)載體PURT5750,采用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)方法將表達(dá)質(zhì)粒PURT5750轉(zhuǎn)化到冠突散囊菌進(jìn)行功能驗證。結(jié)果顯示向基因組隨機(jī)插入外源質(zhì)粒DNA,隨機(jī)挑選11個nsd D基因超表達(dá)轉(zhuǎn)化子,對nsdD基因超表達(dá)轉(zhuǎn)化子菌株培養(yǎng)觀察并與野生型菌株相比發(fā)現(xiàn),在5%和17%NaCl培養(yǎng)基中菌落差異不顯著,而且仍能產(chǎn)生成熟的有性孢子。本實驗為冠突散囊菌有性發(fā)育調(diào)控機(jī)制的研究提供了技術(shù)基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to study the function of nsdD gene in Candida coronalis. In this study, the cDNA of nsdD was placed downstream of the strong promoter glyceraldehyde triphosphate dehydrogenase promoter PgpdA and the terminal TtrpC of tryptophan synthase C gene to construct nsdD gene. PURT5750. Agrobacterium tumefaciens mediated transformation of the expression plasmid PURT5750 to sporocystis coronatum for functional verification. The results showed that the genome was randomly inserted into the exogenous plasmid DNA. Eleven nsdD gene overexpression transformants were randomly selected and compared with wild-type strains. There was no significant difference in colony between 5% and 17 NaCl medium, and mature sexual spores could still be produced. This study provided a technical basis for the study of the regulation mechanism of sexual development of Candida coronatum.
【作者單位】: 湖北醫(yī)藥學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)教研室;貴州省科學(xué)技術(shù)廳;十堰市太和醫(yī)院普外科;貴州省農(nóng)業(yè)生物技術(shù)重點實驗室;貴州省生物技術(shù)研究所;貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院;
【基金】:十堰市科技局項目(ZD2012019) 湖北醫(yī)藥學(xué)院;(2014QDJZR15)共同資助
【分類號】:Q78;Q93
【正文快照】: *通訊作者,gzliuzuoyi@163.comConstruction and Phenotypic Analysis of Over-Expression Strain of nsd DGene in Eurotium cristatumYu Chunfang 1 Xiong Qing 2 Li Wenfang 3 Tan Yumei 4,5 Liu Yongxiang 4,5 Liu Zuoyi 4,6*Ou Qing 1*1 Department of Microbiology,Facu

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本文編號:1446695

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