BAT基因改造對(duì)釀酒酵母高級(jí)醇生成量的影響
本文關(guān)鍵詞:BAT基因改造對(duì)釀酒酵母高級(jí)醇生成量的影響 出處:《現(xiàn)代食品科技》2016年06期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:釀酒酵母BAT基因編碼支鏈氨基酸轉(zhuǎn)氨酶,其中BAT1和BAT2基因分別編碼線粒體和細(xì)胞質(zhì)氨基酸轉(zhuǎn)氨酶,位于細(xì)胞不同的位置導(dǎo)致二者的生理功能有所差異,BAT1基因在線粒體中傾向催化α-酮酸合成氨基酸,細(xì)胞質(zhì)中的BAT2基因?qū)被徂D(zhuǎn)化為α-酮酸,通過(guò)敲除BAT2以減少α-酮酸合成,過(guò)表達(dá)BAT1以增加α-酮酸消耗達(dá)到降低釀酒酵母高級(jí)醇的合成的目的。本研究以釀酒酵母AY15單倍體α5為出發(fā)菌株,結(jié)合融合PCR技術(shù)構(gòu)建重組質(zhì)粒p UC-BABPB1K,獲得BA-PGK-BAT1-BB重組盒,并利用醋酸鋰轉(zhuǎn)化法和同源重組技術(shù)篩選出缺失BAT2基因同時(shí)過(guò)表達(dá)BAT1基因的突變株B-8,將其和親本菌株α5、BAT2基因缺失菌株α5ΔBAT2進(jìn)行酒精發(fā)酵實(shí)驗(yàn),發(fā)酵結(jié)束后進(jìn)行發(fā)酵性能和高級(jí)醇的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,與親本菌株相比,異丁醇降低了25%,異戊醇降低了15%,活性戊醇降低了30%;與α5ΔBAT2菌株相比,異丁醇提高了0.5倍,異戊醇增加了0.1倍,活性戊醇增加了0.3倍。
[Abstract]:The Saccharomyces cerevisiae BAT gene encoding the branched chain amino acid aminotransferase, which BAT1 and BAT2 gene encoding the mitochondrial and cytoplasmic amino acid aminotransferase, located in cells lead to different physiological functions of the two different BAT1 gene in mitochondrial tendency in catalytic alpha keto acid amino acid synthesis, BAT2 gene in the cytoplasm of the conversion of amino acids to alpha keto acid. By knocking out the BAT2 to reduce the alpha keto acid synthesis, overexpression of BAT1 in order to increase the alpha keto acid to reduce the consumption of higher alcohol synthesis in Saccharomyces cerevisiae. In this study, AY15 of Saccharomyces cerevisiae haploid alpha 5 strain with recombinant plasmid P UC-BABPB1K fusion PCR, BA-PGK-BAT1-BB recombinant box, and homologous recombination technology screening of BAT2 gene deletion mutant B-8 and BAT1 gene expression by lithium acetate transformation method, the parent strain and alpha 5, alpha 5 Delta BAT2 gene deletion strain BAT 2 experiments of alcohol fermentation, determination of fermentation after fermentation performance and higher alcohols. The experimental results show that compared with the parent strain, isobutanol, isoamyl alcohol decreased by 25%, down 15%, active amyl alcohol decreased by 30%; compared with alpha 5 Delta BAT2 strains, isobutanol was 0.5 times higher than that of isoprene alcohol increased 0.1 times, active amyl alcohol increased 0.3 times.
【作者單位】: 天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院工業(yè)發(fā)酵微生物教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:天津市科委自然基金重點(diǎn)項(xiàng)目(14JCZDJC32900) 國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31471724)
【分類號(hào)】:TS261.11
【正文快照】:
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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1 劉芳志;張翠英;李維;劉學(xué)強(qiáng);肖冬光;;BAT基因改造對(duì)釀酒酵母高級(jí)醇生成量的影響[J];現(xiàn)代食品科技;2016年06期
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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】
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1 佐一含;朱旭東;陳葉福;呂鴻雁;肖冬光;;LEU2基因敲除對(duì)工業(yè)啤酒酵母高級(jí)醇生成量的影響[J];中國(guó)釀造;2011年03期
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【相似文獻(xiàn)】
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4 張振松;;淺談啤酒高級(jí)醇的影響因素[J];啤酒科技;2010年03期
5 羅惠波;茍?jiān)苖,
本文編號(hào):1419546
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