TaqMan-MGB探針實時PCR用于Duffy血型基因分型的研究
本文關鍵詞:TaqMan-MGB探針實時PCR用于Duffy血型基因分型的研究 出處:《中國輸血雜志》2016年01期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的應用Taq Man-MGB探針實時PCR技術,建立1個Duffy血型基因分型的新方法,了解大連地區(qū)漢族人群Duffy血型等位基因頻率分布特征。方法設計并合成Taq Man-MGB探針實時PCR的引物和探針,應用TaqMan-MGB探針實時PCR對120例健康獻血者的Duffy血型進行基因分型,對其重復性和最低檢出限進行評價。并將該法和傳統(tǒng)的等位基因特異性引物PCR(PCR-ASP)方法進行比較。結果 Taq Man-MGB探針實時PCR方法和PCR-ASP法對Duffy血型的基因分型結果是完全一致的。Taq Man-MGB探針實時PCR再次分型結果和初次基因分型的結果是完全一致的。Taq Man-MGB探針實時PCR的最低檢測限是100 pg。大連漢族人群Duffy血型FY*A基因頻率為93.3%,FY*B的基因頻率為6.7%,其基因分布特點和國內其他地區(qū)漢族人群相似,無顯著性差異(P0.05),但與浙江畬族相比,有顯著性差異(P0.05)。Fya和Fyb抗原不配合幾率為0.116 7。結論應用Taq ManMGB探針實時PCR技術建立的Duffy血型基因分型方法具有快速、簡單、準確、靈敏、重復性好、通量高等特點,優(yōu)于傳統(tǒng)的PCR-ASP法。
[Abstract]:Objective to study the application of Taq Man-MGB real-time PCR technology, to establish a new method for 1 Duffy genotyping, understand the Han population in Dalian area Duffy blood type gene frequency distribution method. Primers and probes were designed and synthesized Taq Man-MGB probe real-time PCR, application of TaqMan-MGB probe real-time PCR in 120 healthy blood donors Duffy blood group genotyping, the repeatability and the lowest detection limit was evaluated. And the traditional method of allele specific primer PCR (PCR-ASP) methods are compared. Results Taq gene Man-MGB probe real-time PCR method and PCR-ASP method for Duffy blood typing results.Taq Man-MGB probe real-time PCR completely consistent again, the results of genotyping and initial genotyping is the lowest detection limit of.Taq Man-MGB probe real-time PCR identical is 100 PG. Duffy in Dalian Han population FY*A blood group gene frequency was 93. 3%, the gene frequency of FY*B was 6.7%, the gene distribution characteristics of Han population and other parts of the country are similar, no significant difference (P0.05), but compared with Zhejiang Yu, there was significant difference (P0.05).Fya and Fyb antigen with a probability of 0.116 7.. Conclusion Taq was used to establish the ManMGB probe real-time PCR Duffy blood group genotyping method is rapid, simple, accurate, sensitive, reproducible, high flux, PCR-ASP is superior to the traditional method.
【作者單位】: 大連市血液中心;大連醫(yī)科大學生物學教研室;
【分類號】:R440
【正文快照】: Duffy血型基因包含4個由單核苷酸多態(tài)性(SNP)產生的等位基因,分別為FY*A、FY*B、FY*X和FY*Fy[1]。共有5種表型:Fy(a+b-)、Fy(a-b+)、Fy(a+b+)、Fy(a-b+w)和Fy(a-b-)[2]。Duffy血型基因FY*A和FY*B,分別編碼血型抗原Fya和Fyb[3]。FY*X導致Fyb抗原氨基酸的改變,使紅細胞表面Fyb抗
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