本文關(guān)鍵詞：玉米赤霉烯酮降解酶基因zhd101表達(dá)載體構(gòu)建及在大腸桿菌中表達(dá)　出處：《畜牧與獸醫(yī)》2016年01期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： 玉米赤霉烯酮 zhd基因 大腸桿菌 表達(dá)

【摘要】：人工合成玉米赤霉烯酮降解酶基因zhd101,以質(zhì)粒p ET32a(+)為表達(dá)載體,構(gòu)建重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3),以IPTG誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化子,通過SDS-PAGE鑒定ZHD101蛋白表達(dá)水平,并純化ZHD101蛋白。結(jié)果表明,重組質(zhì)粒p ET32a(+)-zhde101經(jīng)HindⅢ、SacⅠ酶切后,1%瓊脂糖凝膠電泳證實(shí)zhd101正確插入p ET32a(+)載體。重組菌經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后,表達(dá)的ZHD101蛋白分子量為47.5 ku,蛋白表達(dá)量約占細(xì)菌總蛋白量的35%,純化后的ZHD101蛋白樣品經(jīng)SDS-PAGE和光密度掃描分析表明其純度為95%左右。試驗(yàn)結(jié)果為進(jìn)一步研究ZHD101蛋白功能奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:The artificial synthesis of zearalenone degradation enzyme gene zhd101, plasmid P ET32a (+) as the expression vector, the recombinant plasmid was constructed and transformed into Escherichia coli BL21 (DE3), the transformants were induced by IPTG, the expression level of ZHD101 protein identified by SDS-PAGE, and purified ZHD101 protein. The results show that the recombinant plasmid P (+ ET32a -zhde101) by Hind III, Sac I digestion, 1% agarose gel electrophoresis confirmed that zhd101 ET32a is correctly inserted into P (+) vector. The recombinant bacteria induced by IPTG, ZHD101 protein expression was 47.5 Ku, the expression of about 35% of the amount of total bacterial protein, the purified ZHD101 protein samples by SDS-PAGE and optical density scanning analysis showed that the purity was about 95%. The results laid the foundation for further study of ZHD101 protein function.

【作者單位】： 沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院;四川理工學(xué)院化學(xué)與制藥工程學(xué)院;沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31201961;31302152) 中國博士后科學(xué)基金資助(2014M551125) 遼寧省教育廳科學(xué)研究一般項(xiàng)目(L2014561)
【分類號】：S859.8;S816
【正文快照】： 鐮刀菌產(chǎn)生的玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)是世界上污染最為廣泛的一種毒素[1],具有很強(qiáng)的雌激素樣作用及生殖發(fā)育毒性[2]、免疫毒性[3],如何對該毒素脫毒的研究受到世界各國的普遍重視。傳統(tǒng)的ZEN去毒方法有物理和化學(xué)方法,包括氨化法、堿法、高溫法、紫外線照射法、超濾-

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 涂華榮,齊德生;玉米赤霉烯酮的危害及其防治[J];飼料廣角;2003年08期

2 王雄,王津,程宗佳;飼料中玉米赤霉烯酮快速定量檢測方法的研究[J];飼料廣角;2004年18期

3 李向忠;豬玉米赤霉烯酮中毒的診治[J];中國動(dòng)物檢疫;2004年09期

4 李榮濤,謝剛,付鵬程,羅建偉,陳蘭,吳軍里;小麥和玉米中玉米赤霉烯酮污染情況初探(Ⅰ)[J];糧食儲(chǔ)藏;2004年05期

5 錢利純,尹兆正;玉米赤霉烯酮對畜禽的毒害作用研究進(jìn)展[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2005年09期

6 劉紅衛(wèi),王根峰;生豬玉米赤霉烯酮中毒的診治[J];中國獸醫(yī)雜志;2005年10期

7 陳曉華;劉廣琚;詹廷保;;一例豬玉米赤霉烯酮中毒的診斷[J];河南畜牧獸醫(yī);2006年03期

8 楊春林;;養(yǎng)豬要防玉米赤霉烯酮中毒[J];養(yǎng)殖技術(shù)顧問;2008年03期

9 趙建華;鄒楊;姜淑貞;;玉米赤霉烯酮毒害作用研究進(jìn)展[J];山東畜牧獸醫(yī);2008年08期

10 王春梅;王慶林;;玉米赤霉烯酮對豬的危害及其控制[J];上海畜牧獸醫(yī)通訊;2010年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 姜淑貞;鄒楊;;玉米赤霉烯酮對動(dòng)物的毒害作用研究進(jìn)展[A];2008山東飼料科學(xué)技術(shù)交流大會(huì)論文集[C];2008年

2 張建梅;陳靜;汪官保;谷巍;;玉米赤霉烯酮的污染狀況及生物脫毒研究進(jìn)展[A];2012首屆飼料脫霉技術(shù)研討會(huì)暨霉菌毒素吸附劑大會(huì)論文集[C];2012年

3 饒正華;李蘭;蘇曉鷗;馬東霞;李麗蓓;魏書林;張?zhí)K;;玉米赤霉烯酮解脫毒技術(shù)研究進(jìn)展及發(fā)展趨勢[A];食品、飼料安全與風(fēng)險(xiǎn)評估學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2010年

4 楊建英;崔勝;;玉米赤霉烯酮及代謝物α-玉米赤霉烯醇對雄性小鼠生殖系統(tǒng)的毒性作用[A];全國動(dòng)物生理生化第九次學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2006年

5 陳靜;劉乃芝;武香玉;張建梅;谷巍;;芽孢桿菌去除玉米赤霉烯酮的研究[A];2012首屆飼料脫霉技術(shù)研討會(huì)暨霉菌毒素吸附劑大會(huì)論文集[C];2012年

6 孫志軒;冼鈺茵;孫緯華;梁鐘;邵偉琪;周妮;尹曉菲;楊舜蓮;梁郁強(qiáng);姚冬生;劉大嶺;;對玉米赤霉烯酮有分解作用的微生物的篩選及鑒定[A];2013年飼料毒理學(xué)術(shù)報(bào)告會(huì)暨飼料毒理學(xué)專業(yè)委員會(huì)第五屆全國代表大會(huì)材料集[C];2013年

7 成建國;張印;郭建鳳;;豬玉米赤霉烯酮中毒研究新進(jìn)展[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2004學(xué)術(shù)年會(huì)暨第五屆全國畜牧獸醫(yī)青年科技工作者學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（下冊）[C];2004年

8 雷元培;馬秋剛;趙麗紅;張建云;計(jì)成;鄭文革;;豬玉米赤霉烯酮中毒狀況調(diào)研及玉米赤霉烯酮降解菌對中毒豬癥狀的緩解作用研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)分會(huì)第十一次全國動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

9 楊建英;王國新;劉佳利;羅昊澍;崔勝;;玉米赤霉烯酮和玉米赤霉烯醇對雄性小鼠生殖系統(tǒng)的影響[A];全國動(dòng)物生理生化第十次學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2008年

10 王亞超;鄧俊良;徐世文;;玉米赤霉烯酮對體外培養(yǎng)雞脾臟淋巴細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜內(nèi)科學(xué)分會(huì)第七屆代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（下冊）[C];2011年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)營養(yǎng)衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室 涂華萊邋齊德生;玉米赤霉烯酮的危害及防治[N];中國畜牧獸醫(yī)報(bào);2008年

2 ;規(guī)模養(yǎng)殖場應(yīng)警惕玉米赤霉烯酮中毒[N];中國畜牧獸醫(yī)報(bào);2008年

3 ;規(guī)模養(yǎng)殖場應(yīng)警惕玉米赤霉烯酮中毒[N];中國畜牧獸醫(yī)報(bào);2008年

4 ;規(guī)模養(yǎng)殖場應(yīng)警惕玉米赤霉烯酮中毒[N];中國畜牧獸醫(yī)報(bào);2008年

5 ;王克強(qiáng)：豬患玉米赤霉烯酮中毒病咋辦[N];吉林農(nóng)村報(bào);2008年

6 上海恒豐強(qiáng)動(dòng)物藥業(yè)有限公司 高懷濤;一例疑似玉米赤霉烯酮中毒的診治[N];中國畜牧獸醫(yī)報(bào);2009年

7 華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 劉振利 彭健;從原糧霉變談飼料安全控制[N];中國畜牧報(bào);2005年

8 滄縣韓正莊獸醫(yī)院 龐鐵樁;近期豬病診治體會(huì)[N];河北科技報(bào);2010年

9 上海恒豐強(qiáng)動(dòng)物藥業(yè)有限公司技術(shù)部 高懷濤;生物脫酶劑與普通脫酶劑的區(qū)別[N];中國畜牧獸醫(yī)報(bào);2014年

10 記者 侯玉 通訊員 喬世清;遼寧檢驗(yàn)檢疫局 大通關(guān)提速工程全面啟動(dòng)[N];國際商報(bào);2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前4條

1 姜淑貞;玉米赤霉烯酮對斷奶仔豬的毒性初探及改性蒙脫石的脫毒效應(yīng)研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

2 雷元培;ANSB01G菌對玉米赤霉烯酮的降解機(jī)制及其動(dòng)物試驗(yàn)效果研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

3 余元善;Acinetobacter sp. SM04降解玉米赤霉烯酮的研究[D];華南理工大學(xué);2011年

4 孟輝;谷物、豬飼料和牛奶中赭曲霉毒素A的檢測方法研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 甄建偉;玉米赤霉烯酮對睪丸間質(zhì)細(xì)胞的毒性作用[D];揚(yáng)州大學(xué);2012年

2 劉濤;谷物中玉米赤霉烯酮酶聯(lián)免疫檢測方法的研究[D];天津科技大學(xué);2008年

3 唐寧;玉米赤霉烯酮單抗的制備及初步應(yīng)用[D];揚(yáng)州大學(xué);2009年

4 唐曉倩;玉米赤霉烯酮單克隆抗體研制[D];湖北大學(xué);2012年

5 賈紅;玉米赤霉烯酮單克隆抗體的研制及初步應(yīng)用[D];揚(yáng)州大學(xué);2005年

6 羅小虎;高效液相色譜法測定玉米赤霉烯酮的方法研究[D];西華大學(xué);2009年

7 趙虎;玉米赤霉烯酮對斷奶仔豬生產(chǎn)性能、免疫功能和器官發(fā)育影響的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

8 熊凱華;糧食中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮的污染調(diào)查及降解毒素微生物的篩選[D];南昌大學(xué);2010年

9 駱翼;玉米赤霉烯酮的微生物脫毒研究[D];上海交通大學(xué);2014年

10 單妹;納米級硅酸鹽的改性及對玉米赤霉烯酮、維生素和礦物質(zhì)的吸附作用研究[D];浙江大學(xué);2006年

，

本文編號：1407607