本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)g10evo基因抗草甘膦大豆的研究　出處：《浙江大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 轉(zhuǎn)基因作物 大豆 轉(zhuǎn)化 草甘膦抗性

【摘要】：大豆[Glycine max (L.)]是重要的糧油、飼料和經(jīng)濟(jì)作物,雜草防治是大豆栽培管理中的重要工作,種植抗除草劑轉(zhuǎn)基因大豆可以大幅度提高雜草防治效率,降低雜草防治成本。本研究以本實(shí)驗(yàn)室獲得的草甘膦抗性基因glOevo構(gòu)建植物轉(zhuǎn)化載體pCAMBIA1300-35S-g10evo,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法侵染大豆子葉節(jié),通過誘導(dǎo)、篩選獲得抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆。本研究對(duì)獲得的轉(zhuǎn)基因大豆進(jìn)行草甘膦抗性水平篩選,獲得具有良好抗性的轉(zhuǎn)化株系G10evo。利用Western blot法檢測(cè)G10evo草甘膦抗性基因glOevo的表達(dá),檢測(cè)到大小約為46kDa的表達(dá)蛋白；利用酶聯(lián)免疫法定量分析轉(zhuǎn)基因大豆G10evo V4期抗草甘膦基因的表達(dá)量,結(jié)果顯示第二片復(fù)葉的EPSPS(5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶)含量為276.73μg/g,占總可溶性蛋白的0.76%。Southern blot分析結(jié)果顯示,G10evo含有的外源抗草甘膦基因?yàn)閱慰截惒迦搿＿z傳穩(wěn)定性分析表明,g10evo基因在G10evo各代中能夠穩(wěn)定遺傳。在溫室中進(jìn)行草甘膦抗性測(cè)定,施用4倍正常田間濃度的草甘膦對(duì)G10evo沒有明顯的藥害。G10evo能高抗草甘膦,具有產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用前景。
[Abstract]:Soybean. [Glycine max L.) is an important grain, oil, feed and cash crops. Weed control is an important work in soybean cultivation and management. Planting herbicide resistant transgenic soybean can greatly improve the efficiency of weed control. In this study, glyphosate resistance gene glOevo obtained in our laboratory was used to construct plant transformation vector pCAMBIA1300-35S-g10evo. Transgenic soybean resistant to glyphosate was selected by Agrobacterium tumefaciens mediated infection of soybean cotyledons. Glyphosate resistance level of transgenic soybean was screened. The transgenic strain G10evo. the expression of G10evo glyphosate resistance gene glOevo was detected by Western blot method. The expressed protein was about 46kDa in size. Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) was used to analyze the expression of glyphosate-resistant genes in G10evo V4 transgenic soybean. The results showed that the content of EPSPS5enolpyruvate-3-phosphate synthetase in the second compound leaf was 276.73 渭 g / g. Southern blot analysis showed that the extraneous glyphosate resistant gene contained in G10evo was a single copy insertion, and genetic stability analysis showed that G10evo contained a single copy of glyphosate resistance gene. G10evo gene can be inherited stably in every generation of G10evo. Glyphosate resistance was tested in greenhouse. The application of 4 times normal field concentration of glyphosate had no obvious effect on G10evo. G10evo had high resistance to glyphosate and had the prospect of industrial application.
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S565.1

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 華水金;袁淑娜;邵明彥;倪密;王學(xué)德;蔣立希;祝水金;;抗草甘膦棉花研究進(jìn)展[J];分子植物育種;2007年04期

2 楊子山;;抗草甘膦大豆對(duì)抗草甘膦棉花的干擾作用[J];中國(guó)棉花;2009年11期

3 蘇少泉;抗草甘膦作物的創(chuàng)制與發(fā)展[J];世界農(nóng)業(yè);2004年03期

4 王宏偉;梁業(yè)紅;史振聲;張世煌;;作物抗草甘膦轉(zhuǎn)基因研究概況[J];作物雜志;2007年04期

5 蘇少泉;;抗草甘膦作物的發(fā)展與草甘膦使用中若干問題[J];農(nóng)藥研究與應(yīng)用;2007年04期

6 葉萱;;草甘膦對(duì)抗草甘膦轉(zhuǎn)基因作物病害的作用[J];世界農(nóng)藥;2008年04期

7 卜貴軍;劉洪梅;李英;崔琳;王學(xué)東;;草甘膦對(duì)大豆超微結(jié)構(gòu)及光合指標(biāo)影響的研究[J];電子顯微學(xué)報(bào);2008年04期

8 楊子山;;二代抗草甘膦棉田長(zhǎng)芒莧化除適期試驗(yàn)[J];中國(guó)棉花;2009年09期

9 蘇少泉;;轉(zhuǎn)基因抗草甘膦作物的新進(jìn)展[J];現(xiàn)代農(nóng)藥;2009年06期

10 朱元招;王鳳來;尹靖東;;抗草甘膦大豆及豆粕營(yíng)養(yǎng)成分和抗?fàn)I養(yǎng)因子研究[J];營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào);2010年02期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 韓思寧;金龍國(guó);陶波;邱麗娟;;抗草甘膦真菌的分離及其抗性基因的表達(dá)[A];第23屆全國(guó)大豆科研生產(chǎn)研討會(huì)論文摘要集[C];2012年

2 劉東軍;張銳;孟志剛;郭紅媛;程海剛;王成社;郭三堆;;抗草甘膦基因突變體的克隆及表達(dá)[A];全國(guó)作物生物技術(shù)與誘變技術(shù)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2005年

3 劉東軍;張銳;孫國(guó)清;閆喜中;胡建斌;王成社;郭三堆;;抗草甘膦基因的克隆及其在在棉花中的表達(dá)[A];全國(guó)作物生物技術(shù)與誘變技術(shù)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2005年

4 魏守輝;李香菊;張朝賢;黃紅娟;崔海蘭;;抗草甘膦雜草發(fā)生現(xiàn)狀及轉(zhuǎn)基因大豆田草害治理策略[A];糧食安全與植�？萍紕�(chuàng)新[C];2009年

5 劉琦;李希臣;劉昭軍;雷勃鈞;;抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆基因漂移的研究[A];第五次全國(guó)植物分子育種代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2008年

6 楊兆光;劉亞平;肖遠(yuǎn)龍;;抗草甘膦棉花的雜種優(yōu)勢(shì)研究[A];中國(guó)棉花學(xué)會(huì)2013年年會(huì)論文集[C];2013年

7 郝獻(xiàn)領(lǐng);李志強(qiáng);張敏;陳洪濤;張延忠;李澤田;;室內(nèi)對(duì)轉(zhuǎn)基因抗草甘膦棉花品系鑒定方法[A];中國(guó)棉花學(xué)會(huì)2013年年會(huì)論文集[C];2013年

8 頓保慶;金丹;梁愛敏;陸偉;林敏;;新型高抗草甘膦EPSP合酶基因的拆分和重建[A];2005熱帶亞熱帶微生物資源的遺傳多樣性與基因發(fā)掘利用研討會(huì)論文集[C];2005年

9 潘愛虎;張大兵;潘良文;陳家華;袁政;梁婉琪;;轉(zhuǎn)基因抗草甘膦油菜的實(shí)用PCR檢測(cè)方法[A];全國(guó)作物細(xì)胞工程與分子技術(shù)育種學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2003年

10 朱元招;李德發(fā);尹靖東;王鳳來;;抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆PCR定量檢測(cè)研究[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2004學(xué)術(shù)年會(huì)暨第五屆全國(guó)畜牧獸醫(yī)青年科技工作者學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（上冊(cè)）[C];2004年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前3條

1 方舟子;神秘的“不明病原體”[N];新華每日電訊;2013年

2 本報(bào)記者 馬愛平;我國(guó)抗除草劑轉(zhuǎn)基因技術(shù)突破重圍[N];科技日?qǐng)?bào);2012年

3 實(shí)習(xí)記者 江華;2，，4-滴展現(xiàn)新空間[N];農(nóng)資導(dǎo)報(bào);2012年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 趙特;一種抗草甘膦基因的發(fā)現(xiàn)和抗草甘膦轉(zhuǎn)基因水稻的培育[D];浙江大學(xué);2008年

2 金丹;新型高抗草甘膦EPSPS基因的克隆及草甘膦N-乙酰轉(zhuǎn)移酶的活性位點(diǎn)鑒定[D];四川大學(xué);2007年

3 燕樹鋒;轉(zhuǎn)基因抗草甘膦棉花種質(zhì)系的創(chuàng)造及利用[D];浙江大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 黃潔瓊;農(nóng)桿菌活體轉(zhuǎn)化技術(shù)的優(yōu)化與高抗草甘膦棉種質(zhì)的創(chuàng)制[D];浙江大學(xué);2016年

2 譚苗苗;轉(zhuǎn)g10evo基因抗草甘膦大豆的研究[D];浙江大學(xué);2016年

3 劉吉燾;棉花抗草甘膦基因的初步定位及草甘膦誘導(dǎo)花粉不育的生理生化特性研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

4 李敬娜;農(nóng)桿菌介導(dǎo)的抗草甘膦基因玉米遺傳轉(zhuǎn)化研究[D];海南大學(xué);2010年

5 趙哲;轉(zhuǎn)基因抗草甘膦大豆對(duì)草甘膦代謝產(chǎn)物（AMPA）的生理反應(yīng)[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

6 楚宗艷;棉花抗草甘膦基因的表達(dá)及功能鑒定[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2008年

7 卜貴軍;草甘膦對(duì)大豆葉片生理和形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

8 董流昕;轉(zhuǎn)基因抗草甘膦大豆參比分子的構(gòu)建[D];北京林業(yè)大學(xué);2005年

9 李衛(wèi)國(guó);棉花抗草甘膦體細(xì)胞無性系變異篩選技術(shù)研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

10 于海濤;抗草甘膦真菌的分離及EPSPS基因克隆與表達(dá)研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

本文編號(hào)：1383966