本文關(guān)鍵詞：8年生嫁接轉(zhuǎn)基因楊樹Bt毒蛋白的表達(dá)與運(yùn)輸　出處：《林業(yè)科學(xué)》2016年07期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：【目的】研究經(jīng)歷多年生長和對(duì)復(fù)雜自然環(huán)境適應(yīng)后,嫁接的8年生轉(zhuǎn)基因741楊中外源Bt基因是否穩(wěn)定存在及表達(dá),探索成年樹木Bt毒蛋白的運(yùn)輸部位、運(yùn)輸量、運(yùn)輸?shù)姆较蛐院头e累等規(guī)律。【方法】利用轉(zhuǎn)Bt Cry1Ac基因741楊與未轉(zhuǎn)基因741楊互為砧木和接穗進(jìn)行嫁接,在自然條件下生長8年后,對(duì)2種不同嫁接方式楊樹砧木和接穗的Bt Cry1Ac基因進(jìn)行PCR檢測(cè)和驗(yàn)證,利用ELISA技術(shù)對(duì)成年嫁接楊樹的不同部位、不同組織進(jìn)行毒蛋白含量檢測(cè)。【結(jié)果】Bt Cry1Ac基因的PCR檢測(cè)結(jié)果表明,Pb29/741嫁接楊中接穗部分和741/Pb29嫁接楊中砧木部分均擴(kuò)增出與陽性對(duì)照大小一致的特異性條帶,其余非轉(zhuǎn)基因部分和陰性對(duì)照未擴(kuò)增出特異性條帶,證明Bt基因在嫁接楊樹的轉(zhuǎn)基因部分穩(wěn)定存在,未發(fā)現(xiàn)外源基因丟失現(xiàn)象。ELISA檢測(cè)表明,2種不同嫁接方式處理的741楊砧木和接穗的葉片、韌皮部、木質(zhì)部和髓中均檢測(cè)到Bt毒蛋白存在,證明Bt基因在8年生轉(zhuǎn)基因嫁接741楊中穩(wěn)定表達(dá),且Bt毒蛋白可以在成年嫁接741楊的砧木和接穗間運(yùn)輸。Pb29/741成年株中,根部為非轉(zhuǎn)基因部分,地上枝干部分為轉(zhuǎn)基因組織,地上轉(zhuǎn)基因組織能夠表達(dá)Bt毒蛋白,其含量呈現(xiàn)出樹冠外側(cè)向內(nèi)側(cè)逐漸升高,樹干部分向下又逐漸降低的趨勢(shì),且可以向根和樹干基部非轉(zhuǎn)基因組織運(yùn)輸和積累,以韌皮部運(yùn)輸為主。741/Pb29成年株中,根部為轉(zhuǎn)基因部分,地上枝干為非轉(zhuǎn)基因組織,根和樹干基部組織也可以表達(dá)Bt毒蛋白,且可以由根部和干基部由枝干向樹冠外側(cè)運(yùn)輸并積累,以韌皮部運(yùn)輸為主;非轉(zhuǎn)基因枝干部分呈現(xiàn)出樹干向上逐漸降低,樹冠內(nèi)側(cè)向外側(cè)逐漸升高的趨勢(shì)�！窘Y(jié)論】盡管嫁接方式不同,嫁接的轉(zhuǎn)基因楊樹經(jīng)歷8年生長和復(fù)雜自然環(huán)境的影響和適應(yīng)后,Bt毒蛋白的運(yùn)輸都呈現(xiàn)出由轉(zhuǎn)基因組織向非轉(zhuǎn)基因組織運(yùn)輸現(xiàn)象,毒蛋白含量呈現(xiàn)出類似由源向庫運(yùn)輸和積累的趨勢(shì)。轉(zhuǎn)基因楊樹可以通過傳統(tǒng)嫁接方式在生產(chǎn)上應(yīng)用,以提高轉(zhuǎn)基因林木的生態(tài)安全性。
[Abstract]:......
【作者單位】： 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院河北省林木種質(zhì)資源與森林保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31370663) 國家林業(yè)局科技發(fā)展中心項(xiàng)目(JC-2014-04)
【分類號(hào)】：S792.11
【正文快照】： 隨著植物遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)的發(fā)展,通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)對(duì)林木性狀進(jìn)行遺傳改良已經(jīng)成為林木育種的一條重要途徑(王桂英等,2012;崔旭東等,2013;廖維華等,2013)。將外源基因?qū)胧荏w植物的目的是使外源基因得到高效表達(dá)并使受體植物獲得優(yōu)良性狀(Klocko et al.,2013;Hj錬ltén et al.,201

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本文編號(hào)：1350534