本文關(guān)鍵詞：地黃GGPPS1基因克隆及表達(dá)分析　出處：《西北植物學(xué)報(bào)》2016年05期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：以地黃為材料,通過(guò)分析地黃轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),設(shè)計(jì)特異性引物,克隆了地黃r{牛兒基r{牛兒基焦磷酸合酶(geranylgeranyl pyrophosphate synthase,GGPPS)基因的cDNA序列,命名為RgGGPPS1,GenBank登錄號(hào)為KU258808。同時(shí)在生物信息學(xué)分析的基礎(chǔ)上,進(jìn)行原核表達(dá)、純化以及組織特異性表達(dá)分析。結(jié)果顯示:(1)RgGGPPS1基因開(kāi)放閱讀框?yàn)?87bp,編碼328個(gè)氨基酸。(2)生物信息學(xué)分析結(jié)果顯示,RgGGPPS1蛋白含有2個(gè)富含天冬氨酸的基序(DDXXXXDD和DDXXD),與芝麻等雙子葉植物中的GGPPS蛋白相似性較高。(3)利用構(gòu)建的原核表達(dá)載體pET-32a-RgGGPPS1在大腸桿菌BL21(DE3)菌株中成功表達(dá)RgGGPPS1重組蛋白,采用Ni 2+親和層析得到了純化的RgGGPPS1重組蛋白。(4)熒光定量PCR結(jié)果顯示,RgGGPPS1基因在根中表達(dá)量最高,葉、莖中表達(dá)量較低。研究結(jié)果為進(jìn)一步研究RgGGPPS1基因在地黃環(huán)烯醚萜苷生物合成途徑中的功能奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 河南中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院;呼吸疾病診療與新藥研發(fā)河南省協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：國(guó)家“十二五”科技支撐計(jì)劃(2011BAI06B02) 河南中醫(yī)學(xué)院博士科研基金(BSJJ2011-07,BSJJ2011-18) 第六屆河南中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院大學(xué)生創(chuàng)新學(xué)習(xí)項(xiàng)目(YXCX[2015]3)
【分類號(hào)】：Q943.2;S567.234
【正文快照】： 地黃(Rehmannia glutinosa Libosch)是玄參科地黃屬多年生草本植物,以其塊根入藥,是中國(guó)傳統(tǒng)的常用中藥材,廣泛分布于河南、山西、山東和陜西等地,其中以河南古懷慶府地區(qū)(即溫縣、博愛(ài)、泌陽(yáng)、孟縣)為地黃的道地產(chǎn)區(qū),該地區(qū)所產(chǎn)地黃稱為“懷地黃”,是著名的“四大懷藥”之一[

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1322241