地黃GGPPS1基因克隆及表達分析
發(fā)布時間:2017-12-23 03:25
本文關(guān)鍵詞:地黃GGPPS1基因克隆及表達分析 出處:《西北植物學報》2016年05期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:以地黃為材料,通過分析地黃轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),設(shè)計特異性引物,克隆了地黃r{牛兒基r{牛兒基焦磷酸合酶(geranylgeranyl pyrophosphate synthase,GGPPS)基因的cDNA序列,命名為RgGGPPS1,GenBank登錄號為KU258808。同時在生物信息學分析的基礎(chǔ)上,進行原核表達、純化以及組織特異性表達分析。結(jié)果顯示:(1)RgGGPPS1基因開放閱讀框為987bp,編碼328個氨基酸。(2)生物信息學分析結(jié)果顯示,RgGGPPS1蛋白含有2個富含天冬氨酸的基序(DDXXXXDD和DDXXD),與芝麻等雙子葉植物中的GGPPS蛋白相似性較高。(3)利用構(gòu)建的原核表達載體pET-32a-RgGGPPS1在大腸桿菌BL21(DE3)菌株中成功表達RgGGPPS1重組蛋白,采用Ni 2+親和層析得到了純化的RgGGPPS1重組蛋白。(4)熒光定量PCR結(jié)果顯示,RgGGPPS1基因在根中表達量最高,葉、莖中表達量較低。研究結(jié)果為進一步研究RgGGPPS1基因在地黃環(huán)烯醚萜苷生物合成途徑中的功能奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 河南中醫(yī)學院藥學院;呼吸疾病診療與新藥研發(fā)河南省協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】:國家“十二五”科技支撐計劃(2011BAI06B02) 河南中醫(yī)學院博士科研基金(BSJJ2011-07,BSJJ2011-18) 第六屆河南中醫(yī)學院藥學院大學生創(chuàng)新學習項目(YXCX[2015]3)
【分類號】:Q943.2;S567.234
【正文快照】: 地黃(Rehmannia glutinosa Libosch)是玄參科地黃屬多年生草本植物,以其塊根入藥,是中國傳統(tǒng)的常用中藥材,廣泛分布于河南、山西、山東和陜西等地,其中以河南古懷慶府地區(qū)(即溫縣、博愛、泌陽、孟縣)為地黃的道地產(chǎn)區(qū),該地區(qū)所產(chǎn)地黃稱為“懷地黃”,是著名的“四大懷藥”之一[
【參考文獻】
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2 張萌;蘇平;劉雨佳;童宇茹;趙瑜君;高偉;王秀娟;黃璐琦;;雷公藤r{牛兒基r{牛兒基焦磷酸合酶基因全長cDNA的獲得及生物信息學分析[J];中國中藥雜志;2015年06期
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本文編號:1322241
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