發(fā)狀念珠藻醛酮還原酶基因NfAKR的克隆與表達(dá)
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【摘要】:以發(fā)狀念珠藻細(xì)胞為試材,采用PCR技術(shù)克隆了醛酮還原酶基因的開放閱讀框(ORF)序列,命名為NfAKR。對基因序列特征進(jìn)行了生物信息學(xué)分析,根據(jù)其編碼氨基酸序列預(yù)測了NfAKR蛋白的三維結(jié)構(gòu),同時探討了PEG-6000脅迫下NfAKR的表達(dá)特性。結(jié)果表明:NfAKR基因的編碼序列長912bp,編碼304個氨基酸,預(yù)測其編碼蛋白的相對分子量為33.51kD,理論等電點(diǎn)為4.94,具有醛酮還原酶超家族保守結(jié)構(gòu)域。NfAKR蛋白主要由10個α-螺旋和11β-折疊組成,中間形成一個疏水穴,作為酶的催化活性中心。NfAKR與點(diǎn)形念珠藻處在同一進(jìn)化枝上,具有較近的親緣關(guān)系。qRT-PCR分析顯示,PEG-6000脅迫下NfAKR基因上調(diào)表達(dá),當(dāng)PEG-6000濃度為8%時,其相對表達(dá)量為5.66并達(dá)到峰值。依據(jù)NfAKR基因響應(yīng)干旱脅迫上調(diào)表達(dá)的特性,推測醛酮還原酶可能參與發(fā)狀念珠藻抵御干旱脅迫過程。
【作者單位】: 寧夏大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院西部特色生物資源保護(hù)與利用教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;拉薩市第一中等職業(yè)技術(shù)學(xué)校;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31360025,31360361,31360054) 寧夏大學(xué)研究生創(chuàng)新項(xiàng)目(GIP201611)
【分類號】:Q943.2
【正文快照】: 干旱是影響植物生長最主要的非生物脅迫之一,給植物的生長和產(chǎn)量等帶來諸多不利的影響。干旱、鹽和低溫等非生物逆境會誘導(dǎo)超氧離子、過氧離子、羥自由基等活性氧的積累,導(dǎo)致細(xì)胞中膜脂不飽和脂肪酸的過氧化水平增高,破壞膜結(jié)構(gòu)及膜的生理完整性,對植物產(chǎn)生傷害[1-2]。但它們
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,本文編號:1298789
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