本文關(guān)鍵詞：甘薯非特異性脂質(zhì)轉(zhuǎn)移蛋白基因克隆與表達(dá)分析（英文）

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【摘要】：非特異脂質(zhì)轉(zhuǎn)移蛋白(ns LTP)是植物界普遍存在的一類涉及多種脅迫反應(yīng)的可溶性蛋白。為了闡明甘薯中非特異性脂質(zhì)轉(zhuǎn)移蛋白基因IbLTP1和IbLTP2在鹽脅迫反應(yīng)中的功能,本研究運(yùn)用PCR技術(shù),對(duì)IbLTP1和IbLTP2基因進(jìn)行了克隆,并通過生物信息學(xué)方法分析了序列結(jié)構(gòu)、蛋白質(zhì)保守結(jié)構(gòu)域和系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系;利用q RT-PCR方法檢測(cè)了這兩個(gè)基因在不同組織中的表達(dá)模式以及鹽脅迫條件下的表達(dá)差異;將IbLTP1和IbLTP2基因克隆到大腸桿菌的原核表達(dá)載體p ET32a中,對(duì)重組菌BL21(p ET32a-LTP)的耐鹽性進(jìn)行分析。序列分析表明:IbLTP1和IbLTP2編碼區(qū)均不含內(nèi)含子并都具有等位基因。IbLTP1和IbLTP2基因的蛋白質(zhì)序列分別包括114和94個(gè)氨基酸殘基并且不含色氨酸殘基,蛋白序列N端含有信號(hào)肽序列。保守結(jié)構(gòu)域和系統(tǒng)進(jìn)化分析結(jié)果表明:IbLTP1和IbLTP2均含有ns LTP蛋白的保守結(jié)構(gòu)域,IbLTP1屬于TypeⅠ而IbLTP2屬于TypeⅡ。實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析表明:IbLTP1在幼葉中表達(dá)量最高,根中表達(dá)量最低;而IbLTP2在莖中表達(dá)量最高,成熟葉中表達(dá)量最低。在Na Cl脅迫條件下,IbLTP1和IbLTP2表達(dá)量在根中基本無(wú)變化而在莖和葉中上調(diào)。大腸桿菌BL21(DE3)中異源表達(dá)IbLTP1和IbLTP2基因能夠提高轉(zhuǎn)基因菌株對(duì)Na Cl的耐受性。因此,本研究推測(cè)IbLTP1和IbLTP2基因可能在甘薯鹽脅迫反應(yīng)中發(fā)揮了作用。
【作者單位】： 四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院四川省分子生物學(xué)及生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：supported by grants from the National Science and Technology Pillar Program of China(2007BAD78B03) the “Eleventh-Five” Key Project of Sichuan Province;China(07SG111-003-1)~~
【分類號(hào)】：Q943.2
【正文快照】： Plants are constantly subjected to variousabiotic stresses such as drought,flood,alkalinity,heavy metal toxicity,high salinity,and extremetemperatures throughout their life.In response tothese abiotic stresses,plants often expressnumerous genes related t

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本文編號(hào)：1293054