本文關(guān)鍵詞：家蠶microRNA 7靶基因Bmhairy的鑒定和轉(zhuǎn)錄表達(dá)模式

  更多相關(guān)文章： 家蠶 微小RNA 靶基因 Bmhairy 表達(dá)模式

【摘要】：【目的】micro RNA是一類長約22個(gè)堿基的非編碼RNA,通過與其靶基因的特異性結(jié)合來調(diào)控新陳代謝和生長發(fā)育等多種生命活動(dòng)。鑒定家蠶(Bombyx mori)Bmhairy,比較Bmhairy和bmo-mi R-7的表達(dá)模式,驗(yàn)證Bmhairy是否為bmo-mi R-7的靶基因,為研究家蠶的變態(tài)發(fā)育機(jī)制提供線索�！痉椒ā坑眉倚Q胚胎反轉(zhuǎn)期的總RNA反轉(zhuǎn)錄合成的c DNA模板,克隆Bmhairy編碼區(qū)(coding DNA sequence,CDS)和3′端非翻譯區(qū)(3′untranslated region,3′UTR)并進(jìn)行序列分析�；跓晒舛縋CR和芯片數(shù)據(jù)比較bmo-mi R-7和Bmhairy的表達(dá)模式。利用RNAhybrid和Mi RTif,預(yù)測和分析Bmhairy的m RNA 3′UTR上bmo-mi R-7的靶位點(diǎn)。構(gòu)建熒光素酶報(bào)告基因載體,用家蠶胚胎細(xì)胞系(Bm E)進(jìn)行共轉(zhuǎn)染試驗(yàn),驗(yàn)證bmo-mi R-7對(duì)Bmhairy的3′UTR結(jié)合位點(diǎn)�！窘Y(jié)果】在家蠶中克隆了Bmhairy,含2個(gè)內(nèi)含子和3個(gè)外顯子,CDS長654 bp,編碼217個(gè)氨基酸。Bmhairy的m RNA 3′UTR長366nt。Bmhairy高度保守,含有b HLH、ORANGE和WRPW結(jié)構(gòu)域。Bmhairy與鱗翅目(Lepidoptera)蛺蝶科(Nymphalidae)中的黑脈金斑蝶(Danaus plexippus)相似度最高。Bmo-mi R-7在家蠶胚胎期高量表達(dá),在5齡第3天的精巢中相對(duì)較高,而Bmhairy在成蟲期的表達(dá)量最高,在5齡第3天的頭部相對(duì)較高。Bmhairy m RNA 3′UTR上有bmo-mi R-7一個(gè)靶位點(diǎn)。共轉(zhuǎn)染試驗(yàn)表明,bmo-mi R-7下調(diào)Bmhairy�！窘Y(jié)論】Bmhairy的家蠶時(shí)期表達(dá)和5齡第3天組織表達(dá)均與bmo-mi R-7的表達(dá)呈相反的模式。靶基因預(yù)測和雙熒光素酶轉(zhuǎn)染試驗(yàn)表明Bmhairy是bmo-mi R-7的靶基因,為進(jìn)一步研究bmo-mi R-7和Bmhairy在家蠶體內(nèi)的生物學(xué)功能及調(diào)控關(guān)系提供了依據(jù)。
【作者單位】： 西南大學(xué)家蠶基因組生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家“973”計(jì)劃(2012CB114602) 國家自然科學(xué)基金(31071136,31571334) 重慶市基礎(chǔ)與前沿研究計(jì)劃(cstc2014jcyj A00025)
【分類號(hào)】：S881.2
【正文快照】： 0引言【研究意義】克隆家蠶(Bombyx mori)Bmhairy編碼序列和3′UTR序列、比較bmo-mi R-7和Bmhairy表達(dá)模式、驗(yàn)證Bmhairy是否為bmo-mi R-7的靶基因,對(duì)于深入研究bmo-mi R-7和Bmhairy的生物學(xué)功能以及鱗翅目昆蟲的變態(tài)發(fā)育機(jī)制具有重要意義�！厩叭搜芯窟M(jìn)展】Hairy在果蠅體節(jié)形

【相似文獻(xiàn)】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張丹宇;家蠶bmo-miR-7靶基因Bmhairy的鑒定[D];西南大學(xué);2010年

，

本文編號(hào)：1290475