本文關(guān)鍵詞：柔嫩艾美耳球蟲核糖體蛋白S3a基因的克隆及分析

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【摘要】：根據(jù)Gen Bank中收錄的柔嫩艾美耳球蟲核糖體蛋白S3a基因序列,利用計(jì)算機(jī)軟件設(shè)計(jì)1對引物,從純化的柔嫩艾美耳球蟲第2代裂殖子中提取總RNA,然后應(yīng)用RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增出約810 bp的產(chǎn)物,將其連入p MD18-T載體,經(jīng)雙酶切和PCR鑒定正確后,進(jìn)一步進(jìn)行DNA序列測定。將本研究測序結(jié)果與Gen Bank收錄的柔嫩艾美耳球蟲S3a基因進(jìn)行比對,發(fā)現(xiàn)兩序列間有6個(gè)堿基發(fā)生突變,其中3個(gè)為無義突變,其余為有義突變,同源性為97.9%;本研究擴(kuò)增的S3a基因包含了一個(gè)全長795 bp的完整開放閱讀框(ORF),編碼264個(gè)氨基酸,蛋白分子量約為29.9 KD,ORF堿基同源性為99.0%,推導(dǎo)氨基酸序列同源性為98.1%。將本研究克隆的核糖體蛋白S3a基因與Gen Bank中收錄的人和哺乳動(dòng)物、植物、真菌、禽鳥等共15種真核生物的核糖體蛋白S3a基因進(jìn)行比對發(fā)現(xiàn),雖然本研究克隆和Gen Bank中收錄的柔嫩艾美耳球蟲S3a基因之間同源性最高,但是兩者卻與碩大利什曼原蟲和布氏錐蟲這2種原蟲的S3a基因同源性較低,反而與禽鳥S3a基因的同源性較高。
【作者單位】： 南通出入境檢驗(yàn)檢疫局;江蘇省疾病預(yù)防控制中心;南通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(編號(hào):31301926) 江蘇省自然科學(xué)基金(編號(hào):BK20130388)
【分類號(hào)】：S852.7
【正文快照】： 雞柔嫩艾美耳球蟲(Eimeria tenella)S3a基因是從E.tenella第1代裂殖體λZapⅡc DNA文庫中篩選出來的1種核糖體蛋白(Et S3a)基因,由于它與具有調(diào)節(jié)細(xì)胞周期進(jìn)程和參與蛋白合成的哺乳動(dòng)物核糖體蛋白fte-1、植物核糖體蛋白cyc-07和酵母菌核糖體蛋白MFT1均具有較高的同源性,且其mR

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