本文關(guān)鍵詞：芽孢桿菌產(chǎn)抗菌脂肽調(diào)控基因快速檢測

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【摘要】：[目的]本文旨在建立一種利用PCR技術(shù)鑒別抗菌脂肽類型和篩選抗菌脂肽產(chǎn)生菌的快速、準(zhǔn)確、靈敏的方法。[方法]以枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、淀粉液化芽孢桿菌(B.amyloliquefaciens)和多黏類芽孢桿菌(Paenibacillus polymyxa)的典型菌株為研究對象,針對幾種代表性脂肽的合成酶基因設(shè)計特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,并通過測序法驗(yàn)證檢測結(jié)果的正確性,推測芽孢桿菌生物合成抗菌物質(zhì)的潛在能力。[結(jié)果]PCR結(jié)果表明:所有檢測菌株均具有Surfactin合成酶調(diào)控基因;除P.polymyxa JSa-9外,其他菌株均檢測到Fengycin合成酶基因的存在;而Iturin合成酶基因僅在B.amyloliquefaciens ES-2中檢測得到;B.subtilis fmbj、B.subtilis fmbR、B.subtilis fmbR-2、B.amyloliquefaciens ES-2和P.polymyxa JSa-9-81均具有Bacillomycin D合成酶調(diào)控基因;B.subtilis fmbR、PB2、fmbj、PB198、fmb4、fmb2和fmb3菌株中發(fā)現(xiàn)了Subtilosin A合成酶基因的存在;而只有P.polymyxa JSa-9和P.polymyxa JSa-9-81檢測到Polymyxin合成酶調(diào)控基因。[結(jié)論]基于PCR快速檢測和測序相結(jié)合的方法,我們建立了一種抗菌脂肽產(chǎn)生菌快速識別、篩選和抗菌脂肽快速鑒定的方法,該方法具有快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)等特點(diǎn)。
【作者單位】： 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31271828)
【分類號】：Q78
【正文快照】： 抗菌脂肽類物質(zhì)一般是由革蘭氏陽性芽孢桿菌產(chǎn)生的一類代謝物,隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的迅猛發(fā)展以及抗菌脂肽類物質(zhì)在環(huán)保、石油開采、制藥、食品加工等方面的潛在應(yīng)用價值不斷被發(fā)現(xiàn)[1-2],人們對于在工業(yè)規(guī)模上通過生物技術(shù)方法生產(chǎn)抗菌脂肽產(chǎn)生了強(qiáng)烈興趣。目前已發(fā)現(xiàn)的抗菌活性

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