本文關鍵詞：萵苣過氧化物酶基因克隆及其在種子萌發(fā)中的功能研究

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【摘要】：隨著ROS(O_2~?—、?OH、H_2O_2等)在細胞壁松弛中作用的確立,過氧化物酶(Peroxidase,POD)作為參與合成調(diào)節(jié)ROS的主要酶類一直被人們所熱議。已報道的多篇文章都提出POD在種子萌發(fā)和胚根伸長中活性發(fā)生了變化,POD是否在種子萌發(fā)中起作用,起什么作用,與胚根伸長和胚乳弱化各有什么關系,都不是很清楚,所以本文主要針對POD在種子萌發(fā)中發(fā)揮的功能而作出研究。本文以萵苣(Lactuca sativa L.)種子為材料,用分光光度法檢測在不同萌發(fā)介質(zhì)中,胚根(Radical,RAD)和胚乳帽(Endosperm cap,CAP)中POD酶活性變化。在水中萌發(fā)時,RAD和CAP的POD酶活均表現(xiàn)出持續(xù)升高,且CAP中酶活明顯高于RAD。在0.3%二氯異氰尿酸鈉(Sodium dichloroisocyanurate,SDIC)溶液中萌發(fā)的種子,其完成萌發(fā)的起始時間點推遲,RAD中POD酶活性未變,CAP中酶活性顯著下降。在水楊羥肟酸(Salicylhydroxamic acid,SHAM)的0.3 mM水溶液中萌發(fā)的種子,起始萌發(fā)時間點提前,CAP與RAD共同表現(xiàn)出POD酶活性的顯著下降。用3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine,TMB)組織染色POD結果顯示,POD存在于整個胚乳和胚根部位,各部分的染色深淺變化與分光光度計測得POD酶活性變化一致。通過搜索得到POD EST序列,用cDNA末端快速克隆(Rapid-amplification of cDNA ends,RACE)的技術擴增出該POD的完整cDNA,全長1259 bp,并命名為LsPOD1。利用實時定量聚合酶鏈式反應(Quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)技術,檢測三種萌發(fā)介質(zhì)中不同吸脹時間的RAD和CAP中POD轉(zhuǎn)錄水平的表達。結果顯示,在水中吸脹的種子中,CAP和RAD的LsPOD1表達量都隨著吸脹時間的延長而升高。0.3%SDIC溶液抑制了CAP中LsPOD1的表達,對RAD沒有影響。SHAM的加入上調(diào)了RAD和CAP中LsPOD1的表達。綜合以上實驗結果,得出這樣一個結論:POD在種子萌發(fā)過程中,與細胞壁松弛有相關關系。
【學位授予單位】：華南農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：Q943.2

【參考文獻】

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1 WANG Shu-ping;ZHANG Gai-sheng;SONG Qi-lu;ZHANG Ying-xin;LI Ying;GUO Jia-lin;CHEN Zheng;NIU Na;MA Shou-cai;WANG Jun-wei;;Programmed cell death, antioxidant response and oxidative stress in wheat f lag leaves induced by chemical hybridization agent SQ-1[J];Journal of Integrative Agriculture;2016年01期

2 張昂;鄭瑜琬;陳騰;耿萬剛;房玉林;王華;;葡萄休眠解除過程中冬芽組織活性氧與抗氧化系統(tǒng)的變化特征[J];西北植物學報;2012年10期

3 徐振江;陳兵先;趙晟楠;袁紅霞;郜珊珊;張瑜;陳靖;王曉峰;;種子萌發(fā)過程中胚乳的突破性研究[J];植物生理學報;2012年09期

4 原向陽;郭平毅;張麗光;王鑫;趙銳;郭秀;宋喜娥;;干旱脅迫下草甘膦對抗草甘膦大豆幼苗保護酶活性及脂質(zhì)過氧化作用的影響[J];中國農(nóng)業(yè)科學;2010年04期

5 王啟明;;干旱脅迫對大豆苗期葉片保護酶活性和膜脂過氧化作用的影響[J];農(nóng)業(yè)環(huán)境科學學報;2006年04期

6 蔣明義;荊家海;;植物體內(nèi)羥自由基的產(chǎn)生及其與脂質(zhì)過氧化作用啟動的關系[J];植物生理學通訊;1993年04期

7 劉時中;;自由基與衰老[J];生理科學進展;1983年02期

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本文編號：1263734