本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用雙重?cái)?shù)字PCR對(duì)轉(zhuǎn)基因玉米成分進(jìn)行定量方法研究

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【摘要】：基于微滴式數(shù)字PCR平臺(tái),研究建立了一種在同一個(gè)微滴反應(yīng)體系中同時(shí)測(cè)定樣品中兩種靶序列的雙重微滴式數(shù)字PCR定量方法。結(jié)果表明,所建立的T25品系雙重PCR方法能特異性檢出轉(zhuǎn)基因玉米T25,而其他轉(zhuǎn)基因玉米、油菜、水稻等作物品系均沒(méi)有擴(kuò)增。靈敏度實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,所建立的T25雙重?cái)?shù)字PCR方法,在相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤25%時(shí)可以檢測(cè)到4.6個(gè)T25特異性邊界序列分子,在不考慮各重復(fù)間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差的情況下可以檢測(cè)到1個(gè)拷貝。定量結(jié)果準(zhǔn)確性比較研究顯示,與采用分別定量?jī)?nèi)源基因和T25邊界序列來(lái)定量轉(zhuǎn)基因成分結(jié)果相比較,所建立的T25雙重?cái)?shù)字PCR定量結(jié)果因消除了取樣誤差結(jié)果更準(zhǔn)確,以上研究結(jié)果表明雙重微滴式數(shù)字PCR定量方法比單重微滴式數(shù)字PCR定量方法更適用于進(jìn)出境農(nóng)產(chǎn)品轉(zhuǎn)基因成分的定量檢測(cè)。
【作者單位】： 深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局動(dòng)植物檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心;中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院;深圳市檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院;
【基金】：質(zhì)檢公益項(xiàng)目(201410014-2) 深圳市基礎(chǔ)研究計(jì)劃項(xiàng)目(JC201105190969A) 國(guó)家質(zhì)檢總局項(xiàng)目(2015IK265)
【分類號(hào)】：S513
【正文快照】： 轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物商業(yè)化種植20年以來(lái),全球轉(zhuǎn)基因作物種植面積迅猛發(fā)展,截止2014年全球轉(zhuǎn)基因作物種植面積已達(dá)約1.81億hm2,比2013年增加600萬(wàn)hm2,按照種植面積統(tǒng)計(jì),全球約81%的大豆、35%的玉米、30%的油菜和81%的棉花是轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品,轉(zhuǎn)基因作物種植面積排在前6位的國(guó)家是美國(guó)、巴西

【相似文獻(xiàn)】

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